作者ron55663 (仁)
看板Biotech
標題[方法] 3.7% formaldehyde fix 細胞都飄光光
時間Wed Nov 6 16:22:59 2013
如題
我用3.7% formaldehyde fix 細胞 要做 oil red O 染色
但是每到fix 步驟 細胞都會飄起來 尤其有treat 藥物組別更嚴重
但藥物濃度不能改 有辦法在方法上防止飄起來嗎?
已經超級小心用 pipet一格格慢慢吸慢慢吐了 還是會這樣
請各位大大解
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 120.126.38.179
1F：→ puec2:細胞種類？Plate廠牌？ 11/06 16:52
2F：→ puec2:我們實驗室是發現293在corning上貼得很不好 11/06 16:52
3F：→ ron55663:Huh7 肝癌細胞 11/06 17:06
4F：推 caesar0926:藥會讓細胞掛掉嗎??? 11/07 02:27
5F：推 williamyang:可以先做coating再culture,看會不會改善. 11/07 09:03
6F：→ puec2:我們的經驗是293只會從一塊一塊的掉 變成像掀地毯一樣的掉 11/07 11:08
7F：→ puec2:我的建議是用貴一點的plate試試看 11/07 11:09
8F：→ puec2: \coating後 11/07 11:09
9F：→ KerryWood:用4%paraformaldehyde 11/08 08:41
10F：→ ron55663:4% parformaldehyde 會比較好喔? 11/08 11:34
11F：推 chaunen:玻片先coating, wash的時候用P200把最前面3mm tip頭剪掉 11/09 01:34
12F：推 KerryWood:試試看吧 我都用4%parformaldehyde HEK293也不太會飄 11/10 00:42
13F：→ roy047:4% Paraformaldehyde +1 11/10 16:57
14F：推 leoblack:4% PFA+1 11/11 01:22
15F：→ puec2:不過4%放太久有些抗體就會染不到惹 11/11 10:11
16F：推 leoblack:不論哪種fixation~放太久都不行不是?! 11/11 17:44
17F：推 puec2:1%我可以放一陣子 :p 11/11 18:48
18F：→ ron55663:我單純染脂質 沒有要下抗體 11/12 13:31
19F：推 KerryWood:看染啥東東呀 PFA有時候會破壞某些protein活性 11/13 21:20
20F：推 chaunen:fix太久不好 11/25 07:09