作者ron55663 (仁)
看板Biotech
标题[方法] 3.7% formaldehyde fix 细胞都飘光光
时间Wed Nov 6 16:22:59 2013
如题
我用3.7% formaldehyde fix 细胞 要做 oil red O 染色
但是每到fix 步骤 细胞都会飘起来 尤其有treat 药物组别更严重
但药物浓度不能改 有办法在方法上防止飘起来吗?
已经超级小心用 pipet一格格慢慢吸慢慢吐了 还是会这样
请各位大大解
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◆ From: 120.126.38.179
1F：→ puec2:细胞种类？Plate厂牌？ 11/06 16:52
2F：→ puec2:我们实验室是发现293在corning上贴得很不好 11/06 16:52
3F：→ ron55663:Huh7 肝癌细胞 11/06 17:06
4F：推 caesar0926:药会让细胞挂掉吗??? 11/07 02:27
5F：推 williamyang:可以先做coating再culture,看会不会改善. 11/07 09:03
6F：→ puec2:我们的经验是293只会从一块一块的掉 变成像掀地毯一样的掉 11/07 11:08
7F：→ puec2:我的建议是用贵一点的plate试试看 11/07 11:09
8F：→ puec2: \coating後 11/07 11:09
9F：→ KerryWood:用4%paraformaldehyde 11/08 08:41
10F：→ ron55663:4% parformaldehyde 会比较好喔? 11/08 11:34
11F：推 chaunen:玻片先coating, wash的时候用P200把最前面3mm tip头剪掉 11/09 01:34
12F：推 KerryWood:试试看吧 我都用4%parformaldehyde HEK293也不太会飘 11/10 00:42
13F：→ roy047:4% Paraformaldehyde +1 11/10 16:57
14F：推 leoblack:4% PFA+1 11/11 01:22
15F：→ puec2:不过4%放太久有些抗体就会染不到惹 11/11 10:11
16F：推 leoblack:不论哪种fixation~放太久都不行不是?! 11/11 17:44
17F：推 puec2:1%我可以放一阵子 :p 11/11 18:48
18F：→ ron55663:我单纯染脂质 没有要下抗体 11/12 13:31
19F：推 KerryWood:看染啥东东呀 PFA有时候会破坏某些protein活性 11/13 21:20
20F：推 chaunen:fix太久不好 11/25 07:09