作者EDONIS (ED)
看板Biotech
標題[求救] SDS PAGE 膠不凝
時間Tue Oct 15 17:28:33 2013
請問我這配方有甚麼問題嗎??我試了7~8片都不凝!!
黏黏的!!放過夜冰箱也是呢??爬文看可能是APS問題嗎??
15% Resolving Gel
Total Volume 12 mL
ddH2O 2.76 mL
40% Acrylamide 4.5 mL
1.5M Tris-HCl (pH8.8) 3 mL
10% SDS 120 μL
10% APS 120 μL
TEMED 10 μL
Stacking Gel
Total Volume 3 mL
ddH2O 2.1 mL
40% Acrylamide 375 mL
1.0M Tris (pH6.8) 375 mL
10% SDS 30 μL
10% APS 30 μL
TEMED 2 μL
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◆ From: 140.126.132.89
1F：推 HEK293:APS避光/新鮮否？ 10/15 17:36
2F：推 brume1026:APS重配~ 10/15 17:48
3F：→ EDONIS:APS重配了!!買有點久，可是3個月前使用正常~ 10/15 17:53
4F：推 joseph103331:去借別人家可以用的試試吧 這種大概都是APS過期了 10/15 18:04
5F：→ blence:這個配方怪怪的,為什麼實際總量跟3ml與12ml有明顯差異？ 10/15 18:38
6F：→ EDONIS:恩!!有點差異，但相差不多!!我就造著配了~~~ 10/15 18:49
7F：→ EDONIS:TRIS的PH值。機器不太準，不知道會有影響嗎??爬文好像不會 10/15 18:50
8F：→ blence:Tris跟跑的狀況有關,沒凝八成是APS,太舊的powder會潮解易壞 10/15 18:51
9F：→ blence:體積不對還召用就有點扯了,看一下就知道acryl濃度太高 10/15 18:52
10F：→ blence:你們的配方把acryl30%->40%,體積減少,卻忘記把量補回H2O了 10/15 18:54
11F：→ EDONIS:所以我現在就把水補滿體積就OK了吧!!然後APS可能要重買 10/15 20:40
12F：→ soom:acrylamide gel是化學反應，放冰箱只會更慢 10/15 22:24
13F：推 Ianthegood:acrylamide有沒有含bis 10/16 11:34
14F：推 BGG:APS壞了 10/18 00:44
15F：→ EDONIS:1%bis 1ml+40% Acrylamide37.5ml 配!!這樣比例ok嗎?? 10/19 04:34