作者EDONIS (ED)
看板Biotech
标题[求救] SDS PAGE 胶不凝
时间Tue Oct 15 17:28:33 2013
请问我这配方有甚麽问题吗??我试了7~8片都不凝!!
黏黏的!!放过夜冰箱也是呢??爬文看可能是APS问题吗??
15% Resolving Gel
Total Volume 12 mL
ddH2O 2.76 mL
40% Acrylamide 4.5 mL
1.5M Tris-HCl (pH8.8) 3 mL
10% SDS 120 μL
10% APS 120 μL
TEMED 10 μL
Stacking Gel
Total Volume 3 mL
ddH2O 2.1 mL
40% Acrylamide 375 mL
1.0M Tris (pH6.8) 375 mL
10% SDS 30 μL
10% APS 30 μL
TEMED 2 μL
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.126.132.89
1F：推 HEK293:APS避光/新鲜否？ 10/15 17:36
2F：推 brume1026:APS重配~ 10/15 17:48
3F：→ EDONIS:APS重配了!!买有点久，可是3个月前使用正常~ 10/15 17:53
4F：推 joseph103331:去借别人家可以用的试试吧 这种大概都是APS过期了 10/15 18:04
5F：→ blence:这个配方怪怪的,为什麽实际总量跟3ml与12ml有明显差异？ 10/15 18:38
6F：→ EDONIS:恩!!有点差异，但相差不多!!我就造着配了~~~ 10/15 18:49
7F：→ EDONIS:TRIS的PH值。机器不太准，不知道会有影响吗??爬文好像不会 10/15 18:50
8F：→ blence:Tris跟跑的状况有关,没凝八成是APS,太旧的powder会潮解易坏 10/15 18:51
9F：→ blence:体积不对还召用就有点扯了,看一下就知道acryl浓度太高 10/15 18:52
10F：→ blence:你们的配方把acryl30%->40%,体积减少,却忘记把量补回H2O了 10/15 18:54
11F：→ EDONIS:所以我现在就把水补满体积就OK了吧!!然後APS可能要重买 10/15 20:40
12F：→ soom:acrylamide gel是化学反应，放冰箱只会更慢 10/15 22:24
13F：推 Ianthegood:acrylamide有没有含bis 10/16 11:34
14F：推 BGG:APS坏了 10/18 00:44
15F：→ EDONIS:1%bis 1ml+40% Acrylamide37.5ml 配!!这样比例ok吗?? 10/19 04:34