作者Onagraceae (Epilobium)
看板Biotech
標題[求救] sticky end模版配pfu的問題
時間Thu Aug 8 13:43:14 2013
大家好
如果我現在把一條sticky end的產物作為模版 (例如被EcoRI切過)
再拿pfu或其他類似的有proof reading功能的taq進行amplify
理論上我會拿到blunt end的產物
我想問
他成為blunt end
是因為一開始的overhang被pfu taq切掉?
還是因為overhang的另外一股被補起來?
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.122.152.136
1F：→ xxtomnyxx:3' overhang 被切掉，5' 的則是補齊 08/08 13:45
2F：推 HEK293:到底是pfu還是taq ？ 08/08 14:00
3F：→ Onagraceae:pfu 08/08 14:46
4F：→ Onagraceae:感謝1f的回覆 08/08 14:49
5F：→ Ianthegood:amplify是指pcr? p過邊都是primer囉 08/08 23:42
6F：→ xxtomnyxx:如果只是要把 RE 後的 stick end 補成 blunt，用 08/09 00:01
7F：→ xxtomnyxx:DNA Polymerase I, Large (Klenow) Fragment 就可以了， 08/09 00:02
8F：→ xxtomnyxx:比 Pfu 或其它 proof-reading 的 polymerase 便宜很多 08/09 00:03