作者Onagraceae (Epilobium)
看板Biotech
标题[求救] sticky end模版配pfu的问题
时间Thu Aug 8 13:43:14 2013
大家好
如果我现在把一条sticky end的产物作为模版 (例如被EcoRI切过)
再拿pfu或其他类似的有proof reading功能的taq进行amplify
理论上我会拿到blunt end的产物
我想问
他成为blunt end
是因为一开始的overhang被pfu taq切掉?
还是因为overhang的另外一股被补起来?
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.122.152.136
1F：→ xxtomnyxx:3' overhang 被切掉，5' 的则是补齐 08/08 13:45
2F：推 HEK293:到底是pfu还是taq ？ 08/08 14:00
3F：→ Onagraceae:pfu 08/08 14:46
4F：→ Onagraceae:感谢1f的回覆 08/08 14:49
5F：→ Ianthegood:amplify是指pcr? p过边都是primer罗 08/08 23:42
6F：→ xxtomnyxx:如果只是要把 RE 後的 stick end 补成 blunt，用 08/09 00:01
7F：→ xxtomnyxx:DNA Polymerase I, Large (Klenow) Fragment 就可以了， 08/09 00:02
8F：→ xxtomnyxx:比 Pfu 或其它 proof-reading 的 polymerase 便宜很多 08/09 00:03