作者bravelover99 (劉SIR)
看板Biotech
標題[求救] 肝臟冷凍切片前處理灌流
時間Thu Aug 1 00:45:03 2013
想要請問板上有做過mice小鼠的肝臟灌流實驗的大家
mice的組織不如rat來的大
實驗目的是要為了做冷凍切片染ORO(lipid)的檢體包埋前處理
打算在小鼠犧牲後 先用PBS灌流肝臟(替換血液)再用4%paraformaldhyde固定O/N
>>surcose脫水>>OCT包埋>>切片
所以來到版上詢問
怎麼做肝臟灌流>"<?懇請有做過的大家幫忙提供方法
是所謂的浸泡、亦或是dropper大量沖洗嗎??懇請賜教~~感恩^^
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 163.25.118.58
1F：推 tchan:準備3mlPBS，右心耳(大靜脈處)稍微剪開，PBS針頭從心尖注入 08/01 07:06
2F：推 milkpa:同上，不過3ml不太夠，可用50ml針筒裝PBS or PA，依樓上的 08/01 09:52
3F：→ milkpa:方式，將裝有蝴蝶針（anyway,夠細就行）插到心間，再剪開 08/01 09:53
4F：→ milkpa:右心房，此時血液會大量流出，但心臟仍持續跳動，利用循環 08/01 09:54
5F：→ milkpa:將血液帶出，當流出的液體變成透明（PBS）後，再置換成PA 08/01 09:55
6F：→ milkpa:，因血液已經流光，故血管不會塞住，可以將PA送往全身做前 08/01 09:56
7F：→ milkpa:固定，可適時按壓臟器確認，變硬就可將所需器官組織取下 08/01 09:57
8F：→ milkpa:做後續處理，當然，按照你自己寫的取下固定也行啦...... 08/01 09:58
9F：推 tchan:(sorry手誤)我原本要打30ml，可以多準備些啦，邊打邊觀察 08/01 11:29
10F：推 short945:不一定要到變硬，看到目標臟器或附近肌肉抽猝就差不多了 08/01 19:27
11F：推 goshr:以前老師說灌到眼睛的紅色不見 08/02 09:02
12F：推 short945:只要PBS把血液取代就會讓眼睛的紅色不見，這不代表灌好了 08/02 13:56