作者bravelover99 (刘SIR)
看板Biotech
标题[求救] 肝脏冷冻切片前处理灌流
时间Thu Aug 1 00:45:03 2013
想要请问板上有做过mice小鼠的肝脏灌流实验的大家
mice的组织不如rat来的大
实验目的是要为了做冷冻切片染ORO(lipid)的检体包埋前处理
打算在小鼠牺牲後 先用PBS灌流肝脏(替换血液)再用4%paraformaldhyde固定O/N
>>surcose脱水>>OCT包埋>>切片
所以来到版上询问
怎麽做肝脏灌流>"<?恳请有做过的大家帮忙提供方法
是所谓的浸泡、亦或是dropper大量冲洗吗??恳请赐教~~感恩^^
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.25.118.58
1F：推 tchan:准备3mlPBS，右心耳(大静脉处)稍微剪开，PBS针头从心尖注入 08/01 07:06
2F：推 milkpa:同上，不过3ml不太够，可用50ml针筒装PBS or PA，依楼上的 08/01 09:52
3F：→ milkpa:方式，将装有蝴蝶针（anyway,够细就行）插到心间，再剪开 08/01 09:53
4F：→ milkpa:右心房，此时血液会大量流出，但心脏仍持续跳动，利用循环 08/01 09:54
5F：→ milkpa:将血液带出，当流出的液体变成透明（PBS）後，再置换成PA 08/01 09:55
6F：→ milkpa:，因血液已经流光，故血管不会塞住，可以将PA送往全身做前 08/01 09:56
7F：→ milkpa:固定，可适时按压脏器确认，变硬就可将所需器官组织取下 08/01 09:57
8F：→ milkpa:做後续处理，当然，按照你自己写的取下固定也行啦...... 08/01 09:58
9F：推 tchan:(sorry手误)我原本要打30ml，可以多准备些啦，边打边观察 08/01 11:29
10F：推 short945:不一定要到变硬，看到目标脏器或附近肌肉抽猝就差不多了 08/01 19:27
11F：推 goshr:以前老师说灌到眼睛的红色不见 08/02 09:02
12F：推 short945:只要PBS把血液取代就会让眼睛的红色不见，这不代表灌好了 08/02 13:56