作者lucypurple (安安~^.^~)
看板Biotech
標題[求救] flow分析cell cycle的問題
時間Sat Jul 20 02:19:24 2013
最近用flow跑有treat藥物的癌細胞 (細胞為Huh7)
做了兩次重複的實驗
奇怪的事情就發生在第二次的實驗
第一次用flow分析的時候
cell cycle的分期相當明顯
如圖:
http://ppt.cc/lT~q (control組，只有添加1/1000的DMSO)
但是第二次實驗時
cell cycle的S和G2/M phase就不見了!!
如圖:
http://ppt.cc/2gif (同為control組)
兩次上機前的處理條件都一樣
80%酒精固定3天
PI final concentration: 20 ug/mL
RNase final concentration: 0.2 mg/mL
因為我實在是查不到還有甚麼會使S和G2/M phase消失的可能性
但不知道原因又不太敢再重做一次
所以想請問各位是否有遇過這樣的狀況呢?
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◆ From: 114.47.231.116
1F：推 ZnU:是否有散點圖呢? 07/20 12:38
4F：→ lucypurple:希望各位可以幫我解解惑~~謝謝!!! 07/20 14:13
5F：推 ZnU:第二次實驗中，沒有做DNA content的gating嗎?因為到一個程度 07/21 00:21
6F：→ ZnU:以上的PI intensity通通歸0是不太合理的，就算是第一次實驗也 07/21 00:21
7F：→ ZnU:不會如此 07/21 00:21
8F：→ lucypurple:我也很疑惑!因為兩次的步驟都是一樣的，所以我才想問 07/21 00:34
9F：→ lucypurple:還有甚麼可能會導致這樣的情況發生??? 07/21 00:35
10F：推 biogene:請問是收10000 events嗎? 我想或許第二次是有G2 phase 07/21 15:59
11F：→ biogene:只是不明顯 07/21 15:59
12F：→ lucypurple:我兩種cell 都只收5000 events，而且兩次實驗也都 07/26 09:29
13F：→ lucypurple:收一樣的數目。第二次的G2 phase是甚麼意思呢? 07/26 09:29