作者lucypurple (安安~^.^~)
看板Biotech
标题[求救] flow分析cell cycle的问题
时间Sat Jul 20 02:19:24 2013
最近用flow跑有treat药物的癌细胞 (细胞为Huh7)
做了两次重复的实验
奇怪的事情就发生在第二次的实验
第一次用flow分析的时候
cell cycle的分期相当明显
如图:
http://ppt.cc/lT~q (control组，只有添加1/1000的DMSO)
但是第二次实验时
cell cycle的S和G2/M phase就不见了!!
如图:
http://ppt.cc/2gif (同为control组)
两次上机前的处理条件都一样
80%酒精固定3天
PI final concentration: 20 ug/mL
RNase final concentration: 0.2 mg/mL
因为我实在是查不到还有甚麽会使S和G2/M phase消失的可能性
但不知道原因又不太敢再重做一次
所以想请问各位是否有遇过这样的状况呢?
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 114.47.231.116
1F：推 ZnU:是否有散点图呢? 07/20 12:38
4F：→ lucypurple:希望各位可以帮我解解惑~~谢谢!!! 07/20 14:13
5F：推 ZnU:第二次实验中，没有做DNA content的gating吗?因为到一个程度 07/21 00:21
6F：→ ZnU:以上的PI intensity通通归0是不太合理的，就算是第一次实验也 07/21 00:21
7F：→ ZnU:不会如此 07/21 00:21
8F：→ lucypurple:我也很疑惑!因为两次的步骤都是一样的，所以我才想问 07/21 00:34
9F：→ lucypurple:还有甚麽可能会导致这样的情况发生??? 07/21 00:35
10F：推 biogene:请问是收10000 events吗? 我想或许第二次是有G2 phase 07/21 15:59
11F：→ biogene:只是不明显 07/21 15:59
12F：→ lucypurple:我两种cell 都只收5000 events，而且两次实验也都 07/26 09:29
13F：→ lucypurple:收一样的数目。第二次的G2 phase是甚麽意思呢? 07/26 09:29