作者muffinex (bji4h6)
看板Biotech
標題[求救] 酵素動力學數值分析問題
時間Fri Jun 7 17:26:31 2013
先感謝各位大大解答。
我最近再測酵素動力學時
算出來的Vmax 達7百多mM/min
Km為 2百左右mM
這樣的數值大到有點嚇到我覺得我實驗是否有問題......
酵素的比活性為39 U/ML
請問各位，Vmax 及Km 的數字，有一定的範圍嗎?
再請問如果酵素有稀釋的話，在做計算時，需要把稀釋因子乘回去嗎?
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◆ From: 140.118.160.191
1F：→ jeol1620:比活性的單位應該是U/mg，如果你在測活性的時後基質有用 06/07 22:41
2F：→ jeol1620:到兩倍Km的話(飽和)，Vmax換算出的Kcat應該跟比活性很像 06/07 22:42
3F：→ jeol1620:各種不同的酵素動力學數值差很多，參考其它相似度高的酵 06/07 22:44
4F：→ jeol1620:的酵素看看哩 06/07 22:45
※ 編輯: muffinex 來自: 140.118.160.191 (06/08 18:42)
5F：→ jeol1620:動力學的話不同濃度的基質都要用同樣的最終酵素濃度來做 06/08 19:50
6F：→ jeol1620:這樣才能將計算Kcat=Vmax/[enzyme] 所以有稀釋放同體積 06/08 19:53
7F：→ jeol1620:就是放進去的濃度變少 06/08 19:53
8F：→ jeol1620:對了如果要跟別人比的時後要注意單位，常常在跟老闆討論 06/08 19:54
9F：→ jeol1620:為什麼別人的數據都那麼漂亮的時後仔細一看才發現單位有 06/08 19:55
10F：→ jeol1620:動手腳，有時後也可以用別人測活性的數據反算動力學有沒 06/08 19:55
11F：→ jeol1620:有異常，有時後明明相似的酵素動力學卻天差地遠.... 06/08 19:56
12F：→ muffinex:小妹資質駑鈍，我都有用相同稀釋濃度的酵素作動力學實驗 06/08 20:01
13F：→ muffinex:但數據換算出來的Vmax跟Km要不要把稀釋倍率考慮進去呢? 06/08 20:02
14F：→ jeol1620:不需要哩 酵素加的少只是慢一點到平衡不會影響反應特性 06/08 20:05
15F：→ muffinex:感謝!!! 06/08 20:12
16F：→ muffinex:後來詢問老師，發現Km不會隨酵素濃度變化影響，為固定值 06/11 18:27
→ muffinex:只有Vmax會有變化
06/11 18:28
※ 編輯: muffinex 來自: 140.118.160.191 (06/11 18:30)
17F：→ jeol1620:Vmax應該是基質飽和的速度，酵素放濃還是一樣的最高速度 06/11 22:41
18F：→ jeol1620:應該是指Vmax/酵素濃度出來的Kcat會有變化，通常Vmax不都 06/11 22:43
19F：→ jeol1620:要再換算成Kcat? 06/11 22:43
20F：→ jeol1620:我也來去找老闆確認一下好了XD 搞不好是我記錯了也不一定 06/11 22:45