作者mkmai0802 (Wengda)
看板Biotech
標題[求救] Lipofectamine 細胞毒性原因是 ?
時間Tue Mar 19 02:44:25 2013
我的指導教授 ~
要我比較一下 TurboFect和Lipofectamine的差異 !
我是比較想要改用 Turbofect 啦
我是養CHO-K1 一樣的條件下 Lipofectamine 真的會讓細胞死亡 .....
而且 TurboFect 操作好像更簡化 又便宜一些 ....
以上不是打廣告文 >"<
我想要問一下各位先進 大家都說 Lipofectamine對細胞有毒性 ~
但毒性的原因是甚麼機制造成的 ?
是 Lipofectamine 無法被細胞分解 ?
還是形成的complex太大 導致細胞膜不穩定之類的 !?
(有看到有人寫說 Lipofectamine/DNA complex 大於500nm, 那請問Turbofect/DNA
形成的complex是小到大約是多小)
我還想追加一下問題
Lipofectamine藉由細胞膜融合以及endocytosis進入細胞中 ~
那他的endomosolysis是如何發生的 !
因為Turobofect是利用proton-sponge effect自endosome中脫逃出來 !
那Lipofectamine的機制是 ?
還有Lipofectamine為何在serum會不穩定 ?
是因為帶正電會和蛋白質產生作用嗎 ?
如果是 為何帶正電的polymer不會產生作用 是因為聚合物比較穩定嗎 ?
我也不知道 是哪種 polymer 有先進知道嗎 還是這是商業機密 ?
最後 請問我們教授一直叫我找
Lipofectamine和Turbofect兩者之間的人家做的分析給他看 ~
比如說 為什麼人家會捨棄 Lipofectamine 而改用 Turbofect !
請問這種分析哪裡找的到阿 ? 我到NCBI跟GOOGLE都找不到類似的比較 ?
Thermo官網應該也沒有特別把兩者產品做一對一的全部比較 ...
我把一般網路上 找到的資訊以及 我本來試用的經驗跟他說 ~
他完全不採用 !!
除了一般的細胞毒性較低 步驟簡單 以及不用管serum 跟價格比較便宜之外 ~
我還有問進階說 那轉型的效率以及表達出蛋白的時間是否有很大的差異 ~
得到的回答 都是沒有 ~
我把原理跟教授報告過後以及以上的優點跟他解釋後 !
他還是完全不能接受 .... 我真的不太了解 還有甚麼分析要找給他看 !
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男人和女人要用一株名叫Couple synthetase的酵素催化成Couple ~
這株Synthetase是需要愛心，關心和耐心當做Energy ~
其攜帶的Coenzyme是Destiny。
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 1.164.154.202
1F：→ iceking:我個人覺得,不需要浪費太多時間在這種產品比較上面, 03/19 09:51
2F：→ iceking:反正你自己比較過,覺得哪個好用就用哪個. 03/19 09:52
3F：→ iceking:花太多時間在比較這種"工具",對你的論文並沒有幫助~ 03/19 09:52
4F：→ turtle24:除非你論文題目做這個 不然工具只要合用就好 03/19 10:13
5F：→ mkmai0802:問題在於 教授找我麻煩阿 >"< 03/19 12:15
6F：推 iceking:你必須要先確認,教授要的是甚麼? 他真的很在乎這個嗎? 03/19 13:15
7F：→ iceking:不然你的問題,我以前做的時候也都查過,也都找得到資料~ 03/19 13:15
8F：→ iceking:但我不知道你的教授是不是不接受你所查到的資料. 03/19 13:16
9F：→ iceking:根據以前所查,liposome的毒性是較polymer高,也較易受serum 03/19 13:17
10F：→ iceking:所影響. Turbofect雖號稱不受serum影響,但根據我自己實驗 03/19 13:18
11F：→ iceking:結果,不加serum還是比較好,只是差別沒有很大. 03/19 13:18
12F：→ iceking:但liposome的transfection效率似乎還是略高一點. 03/19 13:20
13F：→ raiyu:問產品專員呢? 03/19 20:40
14F：推 joseph103331:我用Turbo送不了150k的DNA 但Liposome可以 03/19 23:08
15F：→ joseph103331:我也覺得如果本業不是做這個 原理google一下 03/19 23:09
16F：→ joseph103331:知道就OK了 去深究實在不是甚麼好事 03/19 23:10
17F：→ joseph103331:要分析的數據 找產品專員應該OK啦 03/19 23:10
18F：推 Gunish:你老闆是真的想知道兩者實驗資料的差別還是他傾向用 lipo？ 03/20 09:25
19F：推 Gunish:如果他是傾向用 lipofectamine，那就用吧 03/20 09:27
20F：→ Gunish:除非用 lipofectamine 會導致實驗完全做不出來 03/20 09:28
21F：→ Gunish:不然你也可以兩個做 side by side，讓他自行判斷 03/20 09:29
22F：→ Gunish:reagent 的差異難有高下之分，使用習慣的影響有時還比較大 03/20 09:31
23F：推 iceking:我也覺得你老闆想用lipo,可能不想多一個變因，就一直延用 03/20 09:58
24F：推 lail:看能不能請業務幫你申請試用品，兩者一起比較，讓證據說話就 03/20 14:34
25F：→ lail:對了...比一直找書面原理有說服力 03/20 14:35