作者mkmai0802 (Wengda)
看板Biotech
标题[求救] Lipofectamine 细胞毒性原因是 ?
时间Tue Mar 19 02:44:25 2013
我的指导教授 ~
要我比较一下 TurboFect和Lipofectamine的差异 !
我是比较想要改用 Turbofect 啦
我是养CHO-K1 一样的条件下 Lipofectamine 真的会让细胞死亡 .....
而且 TurboFect 操作好像更简化 又便宜一些 ....
以上不是打广告文 >"<
我想要问一下各位先进 大家都说 Lipofectamine对细胞有毒性 ~
但毒性的原因是甚麽机制造成的 ?
是 Lipofectamine 无法被细胞分解 ?
还是形成的complex太大 导致细胞膜不稳定之类的 !?
(有看到有人写说 Lipofectamine/DNA complex 大於500nm, 那请问Turbofect/DNA
形成的complex是小到大约是多小)
我还想追加一下问题
Lipofectamine藉由细胞膜融合以及endocytosis进入细胞中 ~
那他的endomosolysis是如何发生的 !
因为Turobofect是利用proton-sponge effect自endosome中脱逃出来 !
那Lipofectamine的机制是 ?
还有Lipofectamine为何在serum会不稳定 ?
是因为带正电会和蛋白质产生作用吗 ?
如果是 为何带正电的polymer不会产生作用 是因为聚合物比较稳定吗 ?
我也不知道 是哪种 polymer 有先进知道吗 还是这是商业机密 ?
最後 请问我们教授一直叫我找
Lipofectamine和Turbofect两者之间的人家做的分析给他看 ~
比如说 为什麽人家会舍弃 Lipofectamine 而改用 Turbofect !
请问这种分析哪里找的到阿 ? 我到NCBI跟GOOGLE都找不到类似的比较 ?
Thermo官网应该也没有特别把两者产品做一对一的全部比较 ...
我把一般网路上 找到的资讯以及 我本来试用的经验跟他说 ~
他完全不采用 !!
除了一般的细胞毒性较低 步骤简单 以及不用管serum 跟价格比较便宜之外 ~
我还有问进阶说 那转型的效率以及表达出蛋白的时间是否有很大的差异 ~
得到的回答 都是没有 ~
我把原理跟教授报告过後以及以上的优点跟他解释後 !
他还是完全不能接受 .... 我真的不太了解 还有甚麽分析要找给他看 !
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男人和女人要用一株名叫Couple synthetase的酵素催化成Couple ~
这株Synthetase是需要爱心，关心和耐心当做Energy ~
其携带的Coenzyme是Destiny。
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 1.164.154.202
1F：→ iceking:我个人觉得,不需要浪费太多时间在这种产品比较上面, 03/19 09:51
2F：→ iceking:反正你自己比较过,觉得哪个好用就用哪个. 03/19 09:52
3F：→ iceking:花太多时间在比较这种"工具",对你的论文并没有帮助~ 03/19 09:52
4F：→ turtle24:除非你论文题目做这个 不然工具只要合用就好 03/19 10:13
5F：→ mkmai0802:问题在於 教授找我麻烦阿 >"< 03/19 12:15
6F：推 iceking:你必须要先确认,教授要的是甚麽? 他真的很在乎这个吗? 03/19 13:15
7F：→ iceking:不然你的问题,我以前做的时候也都查过,也都找得到资料~ 03/19 13:15
8F：→ iceking:但我不知道你的教授是不是不接受你所查到的资料. 03/19 13:16
9F：→ iceking:根据以前所查,liposome的毒性是较polymer高,也较易受serum 03/19 13:17
10F：→ iceking:所影响. Turbofect虽号称不受serum影响,但根据我自己实验 03/19 13:18
11F：→ iceking:结果,不加serum还是比较好,只是差别没有很大. 03/19 13:18
12F：→ iceking:但liposome的transfection效率似乎还是略高一点. 03/19 13:20
13F：→ raiyu:问产品专员呢? 03/19 20:40
14F：推 joseph103331:我用Turbo送不了150k的DNA 但Liposome可以 03/19 23:08
15F：→ joseph103331:我也觉得如果本业不是做这个 原理google一下 03/19 23:09
16F：→ joseph103331:知道就OK了 去深究实在不是甚麽好事 03/19 23:10
17F：→ joseph103331:要分析的数据 找产品专员应该OK啦 03/19 23:10
18F：推 Gunish:你老板是真的想知道两者实验资料的差别还是他倾向用 lipo？ 03/20 09:25
19F：推 Gunish:如果他是倾向用 lipofectamine，那就用吧 03/20 09:27
20F：→ Gunish:除非用 lipofectamine 会导致实验完全做不出来 03/20 09:28
21F：→ Gunish:不然你也可以两个做 side by side，让他自行判断 03/20 09:29
22F：→ Gunish:reagent 的差异难有高下之分，使用习惯的影响有时还比较大 03/20 09:31
23F：推 iceking:我也觉得你老板想用lipo,可能不想多一个变因，就一直延用 03/20 09:58
24F：推 lail:看能不能请业务帮你申请试用品，两者一起比较，让证据说话就 03/20 14:34
25F：→ lail:对了...比一直找书面原理有说服力 03/20 14:35