作者sjacky (陳小文)
看板Biotech
標題[求救] 以細菌設計Primer進行實驗之問題
時間Sat Mar 2 18:35:26 2013
大家好
請教一下大家，目前的實驗是針對所有細菌的16S設計Primer，
有參考paper & 自行設計的進行PCR實驗
後來發現進行PCR後，跑電泳，在單一菌株的位置是沒有問題的
但是在只有加ddH2O的那一管，在相同的位置也出現Band
ddH2O已經有購買市面上無菌的純水以及所有藥品均已換新進行過實驗
不知道是否所有細菌的Primer不適合以ddH20當作Control？
或 我有甚麼實驗有錯誤嗎？
不懂為什麼ddH2O都會出現與設計片段大小相同的Band
謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 114.38.230.48
1F：→ BGG:Enzyme有些是從菌來的，有可能會污染 03/03 01:15
2F：推 MORAKOT:以前別的實驗室有發生過類似的事情，他們是pipette汙染。 03/03 01:16
3F：→ MORAKOT:以及開蓋tube習慣不佳汙染。 03/03 01:16
4F：→ walter1234:可以用filter的tip試試看 03/04 01:22
5F：→ walter1234:換不同家PCR kit試試看 03/04 01:22
6F：→ walter1234:通常我做這實驗前都會用紫外光照，因為滅菌釜無法消DNA 03/04 01:24
7F：→ chuenwon:就是汙染...... 整個流程都有問題 03/05 13:04
8F：→ sjacky:以相同的水與試劑做病毒,黴菌,原蟲等其他實驗PCR皆無問題 03/05 19:10
9F：→ sjacky:且都是同時進行的,結果都無問題,只有細菌出了問題,請問除了 03/05 19:12
10F：→ sjacky:污染外,還有其他的可能性嗎?或者是酵素原來自細菌的關係呢 03/05 19:13
11F：推 walter1234:所以才說換家PCR kit試試看，之前我換另一家就好了 03/06 12:35
12F：→ walter1234:有時候是廠商的酵素問題，(這問題我也搞了一兩個月) 03/06 12:36