作者sjacky (陈小文)
看板Biotech
标题[求救] 以细菌设计Primer进行实验之问题
时间Sat Mar 2 18:35:26 2013
大家好
请教一下大家，目前的实验是针对所有细菌的16S设计Primer，
有参考paper & 自行设计的进行PCR实验
後来发现进行PCR後，跑电泳，在单一菌株的位置是没有问题的
但是在只有加ddH2O的那一管，在相同的位置也出现Band
ddH2O已经有购买市面上无菌的纯水以及所有药品均已换新进行过实验
不知道是否所有细菌的Primer不适合以ddH20当作Control？
或 我有甚麽实验有错误吗？
不懂为什麽ddH2O都会出现与设计片段大小相同的Band
谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 114.38.230.48
1F：→ BGG:Enzyme有些是从菌来的，有可能会污染 03/03 01:15
2F：推 MORAKOT:以前别的实验室有发生过类似的事情，他们是pipette污染。 03/03 01:16
3F：→ MORAKOT:以及开盖tube习惯不佳污染。 03/03 01:16
4F：→ walter1234:可以用filter的tip试试看 03/04 01:22
5F：→ walter1234:换不同家PCR kit试试看 03/04 01:22
6F：→ walter1234:通常我做这实验前都会用紫外光照，因为灭菌釜无法消DNA 03/04 01:24
7F：→ chuenwon:就是污染...... 整个流程都有问题 03/05 13:04
8F：→ sjacky:以相同的水与试剂做病毒,霉菌,原虫等其他实验PCR皆无问题 03/05 19:10
9F：→ sjacky:且都是同时进行的,结果都无问题,只有细菌出了问题,请问除了 03/05 19:12
10F：→ sjacky:污染外,还有其他的可能性吗?或者是酵素原来自细菌的关系呢 03/05 19:13
11F：推 walter1234:所以才说换家PCR kit试试看，之前我换另一家就好了 03/06 12:35
12F：→ walter1234:有时候是厂商的酵素问题，(这问题我也搞了一两个月) 03/06 12:36