作者bin28 (binbin)
看板Biotech
標題[求救]關於HUVEC的一些問題
時間Sat Feb 23 22:17:43 2013
最近在養HUVEC, 這株細胞真的很難伺候, 養到快崩潰了
遇到的一些問題如下
1. 剛解凍的細胞貼盤數超少
2. 長出來的細胞型態很醜(核很大,而且細胞週邊破碎)
3. Medium => 剛配時有用HCl下去調pH值到7.2
但是大約過一個禮拜pH值上升到7.9
不知道medium的酸鹼值該如何去維持
(另外想請問用HCl調pH值調過頭再用NaOH調會不會有什麼影響)
以上幾點
希望板上有做HUVEC的大大可以給小妹指點迷津Q_______Q
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 114.38.0.54
1F：推 caesar0926:dish有coating東西嗎? 聽學長姐養要coating gelatin 02/23 22:27
2F：→ bin28:有coat 1% gelatin 02/23 22:29
3F：推 captdavince:medium請用CO2調...詳細請看食工所的資料..網路上都有 02/23 22:40
4F：推 jsi:從臍帶分離出來養三、四代後型態常會變。解凍後貼得少，可考慮 02/24 01:03
5F：→ jsi:解凍多管至同一flask養，當天先不用離心洗去DMSO，直接以培養 02/24 01:06
6F：→ jsi:液稀釋DMSO就放進去養，隔天細胞貼好，再換培養液即可。通常兩 02/24 01:07
7F：→ jsi:天換一次培養液至你需要的細胞量，很燒錢。Nature Protocols 02/24 01:12
8F：→ jsi:2,481-485(2007)參考看看。HEPES,sodium bicarbonate+CO2都是 02/24 01:16
9F：→ jsi:用來穩定培養液pH值的方法。有的實驗室喜歡直接用primary cell 02/24 01:18
10F：→ jsi:做實驗。 02/24 01:20
11F：→ a001ou:Medium我們有加HEPES 穩定pH值很威 02/24 03:20
12F：→ untilnow:你用什麼樣的medium? 02/24 12:05
13F：→ bin28:medium是用M199，加20%的FBS 02/24 20:25
※ 編輯: bin28 來自: 114.38.0.54 (02/25 00:11)