作者bin28 (binbin)
看板Biotech
标题[求救]关於HUVEC的一些问题
时间Sat Feb 23 22:17:43 2013
最近在养HUVEC, 这株细胞真的很难伺候, 养到快崩溃了
遇到的一些问题如下
1. 刚解冻的细胞贴盘数超少
2. 长出来的细胞型态很丑(核很大,而且细胞周边破碎)
3. Medium => 刚配时有用HCl下去调pH值到7.2
但是大约过一个礼拜pH值上升到7.9
不知道medium的酸硷值该如何去维持
(另外想请问用HCl调pH值调过头再用NaOH调会不会有什麽影响)
以上几点
希望板上有做HUVEC的大大可以给小妹指点迷津Q_______Q
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 114.38.0.54
1F：推 caesar0926:dish有coating东西吗? 听学长姐养要coating gelatin 02/23 22:27
2F：→ bin28:有coat 1% gelatin 02/23 22:29
3F：推 captdavince:medium请用CO2调...详细请看食工所的资料..网路上都有 02/23 22:40
4F：推 jsi:从脐带分离出来养三、四代後型态常会变。解冻後贴得少，可考虑 02/24 01:03
5F：→ jsi:解冻多管至同一flask养，当天先不用离心洗去DMSO，直接以培养 02/24 01:06
6F：→ jsi:液稀释DMSO就放进去养，隔天细胞贴好，再换培养液即可。通常两 02/24 01:07
7F：→ jsi:天换一次培养液至你需要的细胞量，很烧钱。Nature Protocols 02/24 01:12
8F：→ jsi:2,481-485(2007)参考看看。HEPES,sodium bicarbonate+CO2都是 02/24 01:16
9F：→ jsi:用来稳定培养液pH值的方法。有的实验室喜欢直接用primary cell 02/24 01:18
10F：→ jsi:做实验。 02/24 01:20
11F：→ a001ou:Medium我们有加HEPES 稳定pH值很威 02/24 03:20
12F：→ untilnow:你用什麽样的medium? 02/24 12:05
13F：→ bin28:medium是用M199，加20%的FBS 02/24 20:25
※ 编辑: bin28 来自: 114.38.0.54 (02/25 00:11)