作者emilyliu (微笑下的真實)
看板Biotech
標題[求救] 大鼠體外心臟採血如何避免溶血？
時間Tue Feb 12 11:41:46 2013
實驗需要大鼠體外心臟採血，目前碰到的困難是溶血的情況非常嚴重，
抽十管離心後大概七八管都嚴重溶血，收集的血清也因此無法作後續的實驗，
想請教有經驗的板友有什麼方法可以改善？
以下是抽血的步驟:
1. 約300g SD rat先以chloral hydrate i.p 麻醉 腹部朝上平躺
2. 左手確認心臟位置後，右手使用含有0.1M EDTA 的10 cc針筒接上18G針頭
約45度角刺入，針頭有回血後慢慢回抽。(量至少都有5cc以上)
3. 針頭拔掉，將血液沿管壁注入採血管裡，放入離心機，以3000 rpm 15min條
件離心。
想要取得的血液須有一定的量，所以尾靜脈覺得不適合，雖然也有下腔靜脈可以
抽但實驗關係想盡可能避免開腹部，目前體外心臟採血抽到的想要的量，但卡在
溶血嚴重，請問是否因為步驟上的問題或有其他方法可以避免嚴重的溶血？
謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 114.46.145.121
1F：推 ls4860:那樣技術不好很容易溶血 你可以試試用插管的方式接出來 02/12 11:49
2F：推 tkdiven:眼窩採血呢?? 02/18 17:48
3F：推 jasonstudio:老鼠有給藥嗎 有時候跟樣品也有關 02/21 19:35
4F：→ emilyliu:給藥的話是給STZ去誘導糖尿病老鼠，和沒給藥的老鼠 02/23 19:03
5F：→ emilyliu:相比溶血程度沒有什麼差所以我覺得應該不是藥物問題＠＠ 02/23 19:04
6F：→ emilyliu:T大眼窩採血能採到至少5cc這麼多嗎?另外想請教L大所說 02/23 19:06
7F：→ emilyliu:說的技術該特別注意哪些地方或手法？ 02/23 19:07
8F：推 ls4860:如果要手術的最麻煩的是麻醉藥物的取得及使用 建議可以用 02/28 22:25
9F：→ ls4860:非管制麻醉藥物"舒泰" (這個動物用藥是建議使用時也要同時 02/28 22:27
10F：→ ls4860:打入atropine atropine好像有管制 也可以不用 這是避免唾腺 02/28 22:28
11F：→ ls4860:等分泌 堵塞呼吸道用的) 再來就是剪開大鼠找到動脈插管取 02/28 22:29
12F：→ ls4860:血 手術方面建議可以找貴單位動物中心獸醫師或是有經驗的 02/28 22:29
13F：→ ls4860:研究人員來指導 基本上因為你不是插管做實驗 整個的手術難 02/28 22:30
14F：→ ls4860:度不會很大 02/28 22:30