作者emilyliu (微笑下的真实)
看板Biotech
标题[求救] 大鼠体外心脏采血如何避免溶血？
时间Tue Feb 12 11:41:46 2013
实验需要大鼠体外心脏采血，目前碰到的困难是溶血的情况非常严重，
抽十管离心後大概七八管都严重溶血，收集的血清也因此无法作後续的实验，
想请教有经验的板友有什麽方法可以改善？
以下是抽血的步骤:
1. 约300g SD rat先以chloral hydrate i.p 麻醉 腹部朝上平躺
2. 左手确认心脏位置後，右手使用含有0.1M EDTA 的10 cc针筒接上18G针头
约45度角刺入，针头有回血後慢慢回抽。(量至少都有5cc以上)
3. 针头拔掉，将血液沿管壁注入采血管里，放入离心机，以3000 rpm 15min条
件离心。
想要取得的血液须有一定的量，所以尾静脉觉得不适合，虽然也有下腔静脉可以
抽但实验关系想尽可能避免开腹部，目前体外心脏采血抽到的想要的量，但卡在
溶血严重，请问是否因为步骤上的问题或有其他方法可以避免严重的溶血？
谢谢
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 114.46.145.121
1F：推 ls4860:那样技术不好很容易溶血 你可以试试用插管的方式接出来 02/12 11:49
2F：推 tkdiven:眼窝采血呢?? 02/18 17:48
3F：推 jasonstudio:老鼠有给药吗 有时候跟样品也有关 02/21 19:35
4F：→ emilyliu:给药的话是给STZ去诱导糖尿病老鼠，和没给药的老鼠 02/23 19:03
5F：→ emilyliu:相比溶血程度没有什麽差所以我觉得应该不是药物问题＠＠ 02/23 19:04
6F：→ emilyliu:T大眼窝采血能采到至少5cc这麽多吗?另外想请教L大所说 02/23 19:06
7F：→ emilyliu:说的技术该特别注意哪些地方或手法？ 02/23 19:07
8F：推 ls4860:如果要手术的最麻烦的是麻醉药物的取得及使用 建议可以用 02/28 22:25
9F：→ ls4860:非管制麻醉药物"舒泰" (这个动物用药是建议使用时也要同时 02/28 22:27
10F：→ ls4860:打入atropine atropine好像有管制 也可以不用 这是避免唾腺 02/28 22:28
11F：→ ls4860:等分泌 堵塞呼吸道用的) 再来就是剪开大鼠找到动脉插管取 02/28 22:29
12F：→ ls4860:血 手术方面建议可以找贵单位动物中心兽医师或是有经验的 02/28 22:29
13F：→ ls4860:研究人员来指导 基本上因为你不是插管做实验 整个的手术难 02/28 22:30
14F：→ ls4860:度不会很大 02/28 22:30