作者chowtime (肚子餓了)
看板Biotech
標題[求救]transfection後，從dish分離出單一細胞株?
時間Thu Jan 24 16:19:57 2013
各位前輩大家好~~
最近在做 stable transfection，
大部分的研究通常會挑數個細胞群落來做實驗，
因為每個細胞吃進去的vector數量可能不同，target protein表現量也不相同，
但是我一直有個疑問…
利用抗生素篩選過後dish中有數顆細胞存活下來，
當細胞數目增殖到一定數量的時候，要進行subculture的動作，
可是…要如何分離出單一的細胞群落??
如果要用trypsin把細胞打下來的話，要怎麼樣才能把同一dish上，
不同的細胞群落分別打下來呢~?
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.133.83
1F：推 tsubasawolfy:google cell cylinder 01/24 17:01
2F：推 mesenchymal:用tip挑也可以 01/25 01:00
3F：→ Azusa809:把濾紙剪小塊後滅菌~沾trypsin用黏的也可以~ 01/26 00:48
4F：推 Gunish:用篩選的抗生素濃度分兩組，一組是原來的濃度 01/28 05:47
5F：→ Gunish:一組濃度 1.2~1.5 倍。subculture 最少 1:1000 稀釋 01/28 05:48
6F：→ Gunish:這樣兩種抗生素濃度就有 20 盤。一個禮拜後用 tip 直接挑 01/28 05:49
7F：→ Gunish:subculture 每種抗生素濃度分 10 盤 01/28 05:50
8F：推 Gunish:subculture 時不要心軟，要大量稀釋，不然很容易重做 01/28 05:56