作者chowtime (肚子饿了)
看板Biotech
标题[求救]transfection後，从dish分离出单一细胞株?
时间Thu Jan 24 16:19:57 2013
各位前辈大家好~~
最近在做 stable transfection，
大部分的研究通常会挑数个细胞群落来做实验，
因为每个细胞吃进去的vector数量可能不同，target protein表现量也不相同，
但是我一直有个疑问…
利用抗生素筛选过後dish中有数颗细胞存活下来，
当细胞数目增殖到一定数量的时候，要进行subculture的动作，
可是…要如何分离出单一的细胞群落??
如果要用trypsin把细胞打下来的话，要怎麽样才能把同一dish上，
不同的细胞群落分别打下来呢~?
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.133.83
1F：推 tsubasawolfy:google cell cylinder 01/24 17:01
2F：推 mesenchymal:用tip挑也可以 01/25 01:00
3F：→ Azusa809:把滤纸剪小块後灭菌~沾trypsin用黏的也可以~ 01/26 00:48
4F：推 Gunish:用筛选的抗生素浓度分两组，一组是原来的浓度 01/28 05:47
5F：→ Gunish:一组浓度 1.2~1.5 倍。subculture 最少 1:1000 稀释 01/28 05:48
6F：→ Gunish:这样两种抗生素浓度就有 20 盘。一个礼拜後用 tip 直接挑 01/28 05:49
7F：→ Gunish:subculture 每种抗生素浓度分 10 盘 01/28 05:50
8F：推 Gunish:subculture 时不要心软，要大量稀释，不然很容易重做 01/28 05:56