作者dreamcity (飛行在宇宙中的航海者號)
看板Biotech
標題[求救] 抽plasmid DNA
時間Tue Jan 22 17:43:57 2013
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
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http://www.wretch.cc/album/show.php?i=voyager613&b=8&f=1451756310&p=0
上面是我用Geneaid的kit抽的plasmid DNA,
由左而右是不同的loading量.
我的菌是從-80甘油保存菌株直接挖出來到LB培養O/N後再抽.
但是不管怎麼試,除了一條比較明顯的橫帶是我的plasmid外,上下都會有很多雜質.
不是像一般抽plasmid是很肥的一條這樣.
請問是培養的問題嗎? 還是抽plasmid過程的問題?
謝謝.
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 101.12.77.105
1F：推 conective:抗生素？ 01/22 19:25
2F：推 Peetu:菌體離心後，上清液確實吸乾淨後再加入PD1試試看 01/22 23:11
3F：→ skyken10:chromosome殘留有點嚴重~加入PD2之後手輕一些~ 01/22 23:27
4F：推 leoblack:你的solution I有加RNaseA然後放冰箱嘛?! 01/23 00:19
5F：→ dreamcity:樓上,是的. 01/23 06:06
6F：→ roy047:原po有測測看OD260/280值嗎? 感覺很多都卡在well上 01/23 07:58
7F：推 machin:well上都是genomic DNA吧? 01/23 19:50
8F：推 spirithorse:genomic DNA+1,kit中三種solution加完後,再搖幾下, 01/23 21:16
9F：→ spirithorse:打斷genomic DNA吧~ 01/23 21:16
10F：→ dreamcity:看樣子是搖太大力了....感謝各位. 01/23 23:41