作者dreamcity (飞行在宇宙中的航海者号)
看板Biotech
标题[求救] 抽plasmid DNA
时间Tue Jan 22 17:43:57 2013
发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
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http://www.wretch.cc/album/show.php?i=voyager613&b=8&f=1451756310&p=0
上面是我用Geneaid的kit抽的plasmid DNA,
由左而右是不同的loading量.
我的菌是从-80甘油保存菌株直接挖出来到LB培养O/N後再抽.
但是不管怎麽试,除了一条比较明显的横带是我的plasmid外,上下都会有很多杂质.
不是像一般抽plasmid是很肥的一条这样.
请问是培养的问题吗? 还是抽plasmid过程的问题?
谢谢.
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 101.12.77.105
1F：推 conective:抗生素？ 01/22 19:25
2F：推 Peetu:菌体离心後，上清液确实吸乾净後再加入PD1试试看 01/22 23:11
3F：→ skyken10:chromosome残留有点严重~加入PD2之後手轻一些~ 01/22 23:27
4F：推 leoblack:你的solution I有加RNaseA然後放冰箱嘛?! 01/23 00:19
5F：→ dreamcity:楼上,是的. 01/23 06:06
6F：→ roy047:原po有测测看OD260/280值吗? 感觉很多都卡在well上 01/23 07:58
7F：推 machin:well上都是genomic DNA吧? 01/23 19:50
8F：推 spirithorse:genomic DNA+1,kit中三种solution加完後,再摇几下, 01/23 21:16
9F：→ spirithorse:打断genomic DNA吧~ 01/23 21:16
10F：→ dreamcity:看样子是摇太大力了....感谢各位. 01/23 23:41