作者littledragon (Bouncer)
看板Biotech
標題[求救] 煮IP sample時 有的sample居然變黃綠了..
時間Mon Jan 14 21:15:20 2013
在做免疫沉澱法的時候 最後一個步驟是煮含有smaple buffer的sample
幾個sample當中有時候會出現一兩個隨著95度boil的過程由藍慢慢變綠...
我在煮的過程大概是12分鐘 每三分鐘會把beads拿去vortex spin down
或是用手敲一敲混勻 然後spin down 繼續煮
好像到了RT之後顏色就會變 似乎也聽過這樣的說法
但是大部分是說這不會影響跑膠
但是我跑銀染的結果 卻發現變綠的什麼都看不到
依然是藍的的sample則好好的
不知道變綠的那組是否是因為某原因使蛋白還黏在beads上
因為我loading時不會連beads一起load進去 所以才看不到
還是因為蛋白質因為不知名原因被煮壞掉了....
後者好像很有可能 因為銀染什麼也看不到 其他正常的卻有
但是我完全不知道怎會發生這種事 因為每組的做法基本上都一樣呀
問老師 老師也說從沒遇過 所以請教各位原因 以及有沒有解決方法>"<
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◆ From: 140.122.152.97
1F：→ littledragon:順帶一提 不論用protein A或是protein G都有發生.. 01/14 21:17
2F：→ blence:PSB會由藍變綠甚至變黃跟pH值有關,越酸越偏黃,檢查一下過程 01/14 21:39
3F：→ newmankind:pH有變，check一下pH值 01/14 22:08
4F：→ littledragon:但是TOTAL不會有這個問題 會不會跟我太激烈VORTEX或 01/14 22:14
5F：→ littledragon:敲散它再煮有關? 但有的有有的沒有變色... 01/14 22:15
6F：推 joseph103331:我是有加sample buffer到酸以後變綠啦 煮完變回藍色 01/14 22:57