作者littledragon (Bouncer)
看板Biotech
标题[求救] 煮IP sample时 有的sample居然变黄绿了..
时间Mon Jan 14 21:15:20 2013
在做免疫沉淀法的时候 最後一个步骤是煮含有smaple buffer的sample
几个sample当中有时候会出现一两个随着95度boil的过程由蓝慢慢变绿...
我在煮的过程大概是12分钟 每三分钟会把beads拿去vortex spin down
或是用手敲一敲混匀 然後spin down 继续煮
好像到了RT之後颜色就会变 似乎也听过这样的说法
但是大部分是说这不会影响跑胶
但是我跑银染的结果 却发现变绿的什麽都看不到
依然是蓝的的sample则好好的
不知道变绿的那组是否是因为某原因使蛋白还黏在beads上
因为我loading时不会连beads一起load进去 所以才看不到
还是因为蛋白质因为不知名原因被煮坏掉了....
後者好像很有可能 因为银染什麽也看不到 其他正常的却有
但是我完全不知道怎会发生这种事 因为每组的做法基本上都一样呀
问老师 老师也说从没遇过 所以请教各位原因 以及有没有解决方法>"<
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◆ From: 140.122.152.97
1F：→ littledragon:顺带一提 不论用protein A或是protein G都有发生.. 01/14 21:17
2F：→ blence:PSB会由蓝变绿甚至变黄跟pH值有关,越酸越偏黄,检查一下过程 01/14 21:39
3F：→ newmankind:pH有变，check一下pH值 01/14 22:08
4F：→ littledragon:但是TOTAL不会有这个问题 会不会跟我太激烈VORTEX或 01/14 22:14
5F：→ littledragon:敲散它再煮有关? 但有的有有的没有变色... 01/14 22:15
6F：推 joseph103331:我是有加sample buffer到酸以後变绿啦 煮完变回蓝色 01/14 22:57