作者LIAR (玻璃做的大叔)
看板Biotech
標題[閒聊] trypsin會不會切自己啊？
時間Wed Jan 9 21:22:48 2013
最近才想到，tryspin本身主要是認胺基酸的位置來切，但本身也算是蛋白質的一種，
配的時候也不一定會加其他東西，通常是PBS，偶爾再多一個EDTA，
請問這樣trypsin都不會自爆嗎？還是說本身結構真的沒有R,K露出來？
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起初，他們追殺共產主義者，我沒有說話，因為我不是共產主義者；
接著，他們追殺猶太人，我沒有說話，因為我不是猶太人；
後來，他們追殺工會成員，我沒有說話，因為我不是工會成員；
此後，他們追殺天主教徒，我沒有說話，因為我是新教教徒；
最後，他們奔我而來，卻再也沒有人站起來為我說話了。
《First They Came（他們首次來時）》，Martin Niemoller牧師（1892-1984）
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◆ From: 180.176.35.61
1F：→ blence:你討論的應該是culture級trypsin,通常會autolysis,因此平常 01/09 21:58
2F：→ blence:1倍trypsin不應該回溫太久或直接浸水缸,甚至用前出冰箱就好 01/09 21:59
3F：→ blence:如果是sequence級的trypsin,就會特別修飾residue增加穩定性 01/09 22:02
4F：→ LIAR:我應該是culture等級吧！實驗室平常都配10倍約3.5%，通常用一 01/09 22:53
5F：→ LIAR:兩個月。所以放4度C可以有效延緩自爆速度囉？ 01/09 22:54
6F：推 simonmiho:跟pH也有關..做digestive的buffer pH 可以控制切的速率 01/10 01:25
7F：推 leoblack:trypsin已證實過會自切,所以要低溫保存+EDTA 01/10 03:20
8F：推 martyrtitan:trypsin絕對會自切XDDD 但我做MS 37度c 16小時都還ok 01/10 07:57
9F：→ martyrtitan:已經有很多paper有提出MS or MSMS 的trpsin peak 01/10 07:58
10F：推 skyofsilver:會切自己 所以之前才有廠商大力在推trypo 01/10 11:36