作者LIAR (玻璃做的大叔)
看板Biotech
标题[闲聊] trypsin会不会切自己啊?
时间Wed Jan 9 21:22:48 2013
最近才想到,tryspin本身主要是认胺基酸的位置来切,但本身也算是蛋白质的一种,
配的时候也不一定会加其他东西,通常是PBS,偶尔再多一个EDTA,
请问这样trypsin都不会自爆吗?还是说本身结构真的没有R,K露出来?
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起初,他们追杀共产主义者,我没有说话,因为我不是共产主义者;
接着,他们追杀犹太人,我没有说话,因为我不是犹太人;
後来,他们追杀工会成员,我没有说话,因为我不是工会成员;
此後,他们追杀天主教徒,我没有说话,因为我是新教教徒;
最後,他们奔我而来,却再也没有人站起来为我说话了。
《First They Came(他们首次来时)》,Martin Niemoller牧师(1892-1984)
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◆ From: 180.176.35.61
1F:→ blence:你讨论的应该是culture级trypsin,通常会autolysis,因此平常 01/09 21:58
2F:→ blence:1倍trypsin不应该回温太久或直接浸水缸,甚至用前出冰箱就好 01/09 21:59
3F:→ blence:如果是sequence级的trypsin,就会特别修饰residue增加稳定性 01/09 22:02
4F:→ LIAR:我应该是culture等级吧!实验室平常都配10倍约3.5%,通常用一 01/09 22:53
5F:→ LIAR:两个月。所以放4度C可以有效延缓自爆速度罗? 01/09 22:54
6F:推 simonmiho:跟pH也有关..做digestive的buffer pH 可以控制切的速率 01/10 01:25
7F:推 leoblack:trypsin已证实过会自切,所以要低温保存+EDTA 01/10 03:20
8F:推 martyrtitan:trypsin绝对会自切XDDD 但我做MS 37度c 16小时都还ok 01/10 07:57
9F:→ martyrtitan:已经有很多paper有提出MS or MSMS 的trpsin peak 01/10 07:58
10F:推 skyofsilver:会切自己 所以之前才有厂商大力在推trypo 01/10 11:36