作者LIAR (玻璃做的大叔)
看板Biotech
标题[闲聊] trypsin会不会切自己啊？
时间Wed Jan 9 21:22:48 2013
最近才想到，tryspin本身主要是认胺基酸的位置来切，但本身也算是蛋白质的一种，
配的时候也不一定会加其他东西，通常是PBS，偶尔再多一个EDTA，
请问这样trypsin都不会自爆吗？还是说本身结构真的没有R,K露出来？
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起初，他们追杀共产主义者，我没有说话，因为我不是共产主义者；
接着，他们追杀犹太人，我没有说话，因为我不是犹太人；
後来，他们追杀工会成员，我没有说话，因为我不是工会成员；
此後，他们追杀天主教徒，我没有说话，因为我是新教教徒；
最後，他们奔我而来，却再也没有人站起来为我说话了。
《First They Came（他们首次来时）》，Martin Niemoller牧师（1892-1984）
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◆ From: 180.176.35.61
1F：→ blence:你讨论的应该是culture级trypsin,通常会autolysis,因此平常 01/09 21:58
2F：→ blence:1倍trypsin不应该回温太久或直接浸水缸,甚至用前出冰箱就好 01/09 21:59
3F：→ blence:如果是sequence级的trypsin,就会特别修饰residue增加稳定性 01/09 22:02
4F：→ LIAR:我应该是culture等级吧！实验室平常都配10倍约3.5%，通常用一 01/09 22:53
5F：→ LIAR:两个月。所以放4度C可以有效延缓自爆速度罗？ 01/09 22:54
6F：推 simonmiho:跟pH也有关..做digestive的buffer pH 可以控制切的速率 01/10 01:25
7F：推 leoblack:trypsin已证实过会自切,所以要低温保存+EDTA 01/10 03:20
8F：推 martyrtitan:trypsin绝对会自切XDDD 但我做MS 37度c 16小时都还ok 01/10 07:57
9F：→ martyrtitan:已经有很多paper有提出MS or MSMS 的trpsin peak 01/10 07:58
10F：推 skyofsilver:会切自己 所以之前才有厂商大力在推trypo 01/10 11:36