作者vconquer (vconquer)
看板Biotech
標題[求救] plasmid 問題
時間Fri Dec 14 23:56:29 2012
請各位原諒小妹我才疏學淺
最近抽plasmid後跑膠 都會出現smear的情形
請問有什麼樣的問題 難道是膠品質問題 (因marker 也怪怪的) 還是elution solution太髒
菌 是前兩天剛從-80畫到plate上 昨天養今天抽的
請各位高手相助 非常感謝 拜託
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◆ From: 180.177.3.103
1F：推 joseph103331:跟別人借點膠來跑跑就知道是否是膠了 12/15 00:26
2F：→ skybreeze:抽plasmid用的菌量會不會太多!? 12/15 01:41
3F：→ maniac820:plamid有沒有先linearize才跑膠？用幾%的膠跟plasmid的 12/15 02:09
4F：→ maniac820:大小也有關 12/15 02:09
5F：→ vconquer:我是用0.8 % 膠來跑 12/15 08:29
6F：→ vconquer:沒有切成線性 但之前都不會這樣 菌量太多要怎麼分辨？ 12/15 08:31
7F：→ skybreeze:你抽plasmid的菌 養的時間跟使用量 會影響菌量 12/15 09:48
8F：→ skybreeze:有時候菌量過多 會造成一些genomic DNA被抽到 12/15 09:48
9F：→ skybreeze:這只是臆測 最好是能有膠圖給大家看 不然跟隔空抓藥 12/15 09:49
10F：→ skybreeze:一樣 最快的方式 是配新的膠跟用新的marker重跑一次 12/15 09:49
11F：→ skybreeze:先確定是抽出來的plasmid有問題 12/15 09:50
12F：推 crazybrian:你的膠該不會是用水泡的? 12/15 14:57
13F：→ vconquer:用水泡？？？ 好等我回學校補上圖 12/15 16:27
14F：推 afresh72:我有碰過，抽plasmid的kit有問題時，跑膠都smear。 12/15 21:24
15F：推 silentence:marker也有問題可能是膠沒凝好就跑 也會拖成一片 12/16 16:50
16F：→ vconquer:請問a大 你kit是那個藥品有問題？ 12/17 00:38
17F：推 CD133:有加RNase嗎？如果沒有，你看到的是RNA smear 12/18 11:45
18F：→ vconquer:沒加 但一般抽會加嗎? 12/22 00:46
19F：推 icome:一般kit都會加吧 摻在第一罐buffer裡面 12/28 05:46