作者vconquer (vconquer)
看板Biotech
标题[求救] plasmid 问题
时间Fri Dec 14 23:56:29 2012
请各位原谅小妹我才疏学浅
最近抽plasmid後跑胶 都会出现smear的情形
请问有什麽样的问题 难道是胶品质问题 (因marker 也怪怪的) 还是elution solution太脏
菌 是前两天刚从-80画到plate上 昨天养今天抽的
请各位高手相助 非常感谢 拜托
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◆ From: 180.177.3.103
1F：推 joseph103331:跟别人借点胶来跑跑就知道是否是胶了 12/15 00:26
2F：→ skybreeze:抽plasmid用的菌量会不会太多!? 12/15 01:41
3F：→ maniac820:plamid有没有先linearize才跑胶？用几%的胶跟plasmid的 12/15 02:09
4F：→ maniac820:大小也有关 12/15 02:09
5F：→ vconquer:我是用0.8 % 胶来跑 12/15 08:29
6F：→ vconquer:没有切成线性 但之前都不会这样 菌量太多要怎麽分辨？ 12/15 08:31
7F：→ skybreeze:你抽plasmid的菌 养的时间跟使用量 会影响菌量 12/15 09:48
8F：→ skybreeze:有时候菌量过多 会造成一些genomic DNA被抽到 12/15 09:48
9F：→ skybreeze:这只是臆测 最好是能有胶图给大家看 不然跟隔空抓药 12/15 09:49
10F：→ skybreeze:一样 最快的方式 是配新的胶跟用新的marker重跑一次 12/15 09:49
11F：→ skybreeze:先确定是抽出来的plasmid有问题 12/15 09:50
12F：推 crazybrian:你的胶该不会是用水泡的? 12/15 14:57
13F：→ vconquer:用水泡？？？ 好等我回学校补上图 12/15 16:27
14F：推 afresh72:我有碰过，抽plasmid的kit有问题时，跑胶都smear。 12/15 21:24
15F：推 silentence:marker也有问题可能是胶没凝好就跑 也会拖成一片 12/16 16:50
16F：→ vconquer:请问a大 你kit是那个药品有问题？ 12/17 00:38
17F：推 CD133:有加RNase吗？如果没有，你看到的是RNA smear 12/18 11:45
18F：→ vconquer:没加 但一般抽会加吗? 12/22 00:46
19F：推 icome:一般kit都会加吧 掺在第一罐buffer里面 12/28 05:46