作者McCabe (姓消名遣字無聊)
看板Biotech
標題[方法] Heat-induced epitope retrieval
時間Sun Dec 9 02:36:19 2012
最近在嘗試免疫染色, 一直染不太上去.
雖然懷疑抗體本身有問題, 老師確很肯定的說抗體沒問題.
問題有可能在過度的固定.
那麼, 就得操作所謂的Heat-induce epitope retreival
請問這邊有人有這方面的經驗嗎?
聽說就是把切片放進去特別的溶液中煮一煮?!
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◆ From: 114.47.160.151
1F：推 caesar0926:上網antigen retreival 很多捏 12/09 17:20
2F：推 CD133:antigen retrieval本來就是IHC的關鍵步驟，不同的抗體、組織 12/11 08:48
3F：→ CD133:以及固定方式，都需配合不同的retreival方式。 12/11 08:49
4F：推 goshr:FFPE的切片, 都要經過antigen retrieval的步驟 12/11 11:25
5F：→ goshr:不同的抗體有不同的方式, 看看說明書裡有沒有說囉, 否則要試 12/11 11:27
6F：→ goshr:建議先從citrate pH6開始試, 再試EDTA pH8, tris-EDTA pH9 12/11 11:29
7F：→ goshr:太強的retrieval可能會造成false positive喔 12/11 11:29
8F：推 lupeashn:Proteinase K 也是其中一種方式!也可買Comercial kit來試 12/11 21:08