作者McCabe (姓消名遣字无聊)
看板Biotech
标题[方法] Heat-induced epitope retrieval
时间Sun Dec 9 02:36:19 2012
最近在尝试免疫染色, 一直染不太上去.
虽然怀疑抗体本身有问题, 老师确很肯定的说抗体没问题.
问题有可能在过度的固定.
那麽, 就得操作所谓的Heat-induce epitope retreival
请问这边有人有这方面的经验吗?
听说就是把切片放进去特别的溶液中煮一煮?!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 114.47.160.151
1F:推 caesar0926:上网antigen retreival 很多捏 12/09 17:20
2F:推 CD133:antigen retrieval本来就是IHC的关键步骤,不同的抗体、组织 12/11 08:48
3F:→ CD133:以及固定方式,都需配合不同的retreival方式。 12/11 08:49
4F:推 goshr:FFPE的切片, 都要经过antigen retrieval的步骤 12/11 11:25
5F:→ goshr:不同的抗体有不同的方式, 看看说明书里有没有说罗, 否则要试 12/11 11:27
6F:→ goshr:建议先从citrate pH6开始试, 再试EDTA pH8, tris-EDTA pH9 12/11 11:29
7F:→ goshr:太强的retrieval可能会造成false positive喔 12/11 11:29
8F:推 lupeashn:Proteinase K 也是其中一种方式!也可买Comercial kit来试 12/11 21:08