作者keeny (keeny NN )
看板Biotech
標題[討論]Western blot 抗體跑FACS?
時間Thu Dec 6 06:49:06 2012
請教各位高手
有沒有人用WB的抗體跑過flow?
我最近遇到一個難解的結果
siRNA KO目標蛋白tetraspanin CD82用WB可以看到>90% KO
FACS卻顯示細胞表面CD82沒變化而且flurorescent intensity很弱
感覺有點難解釋(其實是有很多可能啦)
但是要是因為是FACS抗體不好的話我的問題會變簡單許多
所以我想要用WB抗體去跑FACS
大家有沒有甚麼看法?
謝謝指教
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oh my god!! 我又在枕頭上流口水啦！！
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 150.231.246.1
1F：推 joseph103331:siRNA會Knock out嗎? 應該是Knock down吧~ 12/06 08:35
2F：→ joseph103331:fluoroscent intensity變弱不就表示有KD了嗎? 12/06 08:36
3F：→ blence:你有先測試這支抗體可以染完可以用FACS看嗎？ 12/06 10:12
4F：→ blence:實驗應該先比較有無一抗下,2抗染色後有沒差別的測試吧 12/06 10:14
5F：→ blence:另外沒有所謂WB抗體,只有抗體能適用如WB,ICC,FACS哪些實驗 12/06 10:16
6F：→ williamyang:跑FACS建議買專用的,如BD,eBiosciencec或是biolegend 12/06 10:38
7F：推 qiet:連control組螢光都很弱? 抗體壞掉? 12/06 16:31
8F：→ keeny:thanks for comments. 12/07 00:17
9F：推 hsuwenli:推"跑FACS建議買專用的"! 12/14 23:06