作者keeny (keeny NN )
看板Biotech
标题[讨论]Western blot 抗体跑FACS?
时间Thu Dec 6 06:49:06 2012
请教各位高手
有没有人用WB的抗体跑过flow?
我最近遇到一个难解的结果
siRNA KO目标蛋白tetraspanin CD82用WB可以看到>90% KO
FACS却显示细胞表面CD82没变化而且flurorescent intensity很弱
感觉有点难解释(其实是有很多可能啦)
但是要是因为是FACS抗体不好的话我的问题会变简单许多
所以我想要用WB抗体去跑FACS
大家有没有甚麽看法?
谢谢指教
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oh my god!! 我又在枕头上流口水啦！！
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 150.231.246.1
1F：推 joseph103331:siRNA会Knock out吗? 应该是Knock down吧~ 12/06 08:35
2F：→ joseph103331:fluoroscent intensity变弱不就表示有KD了吗? 12/06 08:36
3F：→ blence:你有先测试这支抗体可以染完可以用FACS看吗？ 12/06 10:12
4F：→ blence:实验应该先比较有无一抗下,2抗染色後有没差别的测试吧 12/06 10:14
5F：→ blence:另外没有所谓WB抗体,只有抗体能适用如WB,ICC,FACS哪些实验 12/06 10:16
6F：→ williamyang:跑FACS建议买专用的,如BD,eBiosciencec或是biolegend 12/06 10:38
7F：推 qiet:连control组萤光都很弱? 抗体坏掉? 12/06 16:31
8F：→ keeny:thanks for comments. 12/07 00:17
9F：推 hsuwenli:推"跑FACS建议买专用的"! 12/14 23:06