作者fablissful ()
看板Biotech
標題[方法] wound healing assay
時間Tue Oct 16 12:01:16 2012
最近要開始做這項實驗
想請問各位有經驗的大大們~
基本上在做轉移會先做invasion再做migration
我之前都是用transwell來做這兩項實驗
時間點都是做一樣的 都是以對細胞不致死的濃度去做
不過現在要做wound healing就想請問時間點是否也是一樣呢?
還是有要特別多還是跟invasion一樣?
會煩惱是因為之前invasion跟migration都是用transwell所以才會一樣
因此現在換wound就要更改時間點?
另外拍照過後是要用如何來定量呢?
因為第一次做這項實驗 PAPER寫的也沒有很詳細
所以上來請教各位大大
(跪拜)
感謝大家了
以上
感謝各位
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◆ From: 140.120.104.95
※ 編輯: fablissful 來自: 140.120.104.95 (10/16 12:02)
※ 編輯: fablissful 來自: 140.120.104.95 (10/16 13:05)
1F：推 HEK293:一般來說，transwell是做invasiveness，wound healing是 10/16 13:39
2F：→ HEK293:migration/motility吧... 10/16 13:40
3F：推 vancent:transwell不COATING MATRIGEL也可以算MIGRATION 10/16 21:14
4F：→ fablissful:請問要如何定量呢?單純拍照就好,還是要下載特定軟體? 10/17 13:52
5F：→ fablissful:感謝各位了:) 10/17 13:52
6F：→ vancent:上層細胞擦掉以CRYSTALVIOLET染色後在顯微鏡下拍照 10/17 23:29
7F：→ vancent:之後取隨機三視野做IMAGE J的定量 再做BAR圖即可 10/17 23:29
8F：→ vancent:要染O/N效果比較好 最好先用formalin fix 10/17 23:29