作者fablissful ()
看板Biotech
标题[方法] wound healing assay
时间Tue Oct 16 12:01:16 2012
最近要开始做这项实验
想请问各位有经验的大大们~
基本上在做转移会先做invasion再做migration
我之前都是用transwell来做这两项实验
时间点都是做一样的 都是以对细胞不致死的浓度去做
不过现在要做wound healing就想请问时间点是否也是一样呢?
还是有要特别多还是跟invasion一样?
会烦恼是因为之前invasion跟migration都是用transwell所以才会一样
因此现在换wound就要更改时间点?
另外拍照过後是要用如何来定量呢?
因为第一次做这项实验 PAPER写的也没有很详细
所以上来请教各位大大
(跪拜)
感谢大家了
以上
感谢各位
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.120.104.95
※ 编辑: fablissful 来自: 140.120.104.95 (10/16 12:02)
※ 编辑: fablissful 来自: 140.120.104.95 (10/16 13:05)
1F：推 HEK293:一般来说，transwell是做invasiveness，wound healing是 10/16 13:39
2F：→ HEK293:migration/motility吧... 10/16 13:40
3F：推 vancent:transwell不COATING MATRIGEL也可以算MIGRATION 10/16 21:14
4F：→ fablissful:请问要如何定量呢?单纯拍照就好,还是要下载特定软体? 10/17 13:52
5F：→ fablissful:感谢各位了:) 10/17 13:52
6F：→ vancent:上层细胞擦掉以CRYSTALVIOLET染色後在显微镜下拍照 10/17 23:29
7F：→ vancent:之後取随机三视野做IMAGE J的定量 再做BAR图即可 10/17 23:29
8F：→ vancent:要染O/N效果比较好 最好先用formalin fix 10/17 23:29