作者caesar0926 (嗚哈哈)
看板Biotech
標題[方法] 冷凍切片 組織處理
時間Sat Oct 6 23:53:05 2012
各位先進!!!!!
想請問大家
欲冷凍切片的組織取下後會固定嗎?
我是打算用4%PFA固定但 是似乎會對日後染色有所影響
雖說不是每隻抗體都會影響，但保守考量之下
想請問其他固定方法 acetone是否可以作為固定液 在使用上需要注意什麼?
另外 常看到會有蔗糖脫水的步驟
想請問這步驟是必需的嗎?若不脫水會造成什麼樣的影響?
因為實驗室一些人似乎也沒有做這個動作
麻煩各位!!謝謝大家
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◆ From: 111.242.80.80
1F：→ vandia:PFA對免疫染色的影響比較小,別用acetone 10/07 08:54
2F：推 leoblack:推樓上~目前對染色影響較小的還是PFA~ 10/07 09:48
3F：推 susu8n0:不脫水冷凍後組織中有冰晶，切片會坑坑洞洞 10/07 10:57
4F：→ goshr:要用PFA固定的話, 何不做石蠟切片呢 ^^ 10/07 15:07
速度比較快，目前我用的是臘切，我的認知石蠟和冷凍切片的抗原完整度還是有差?並且在
paper上我的sample大多還是以冷切為主
所以想試試看冷切
5F：推 vandia:石蠟要加熱,有些抗體會認不到... 10/07 19:34
謝謝各位!!!!!!!
※ 編輯: caesar0926 來自: 111.242.80.80 (10/08 00:09)