作者caesar0926 (呜哈哈)
看板Biotech
标题[方法] 冷冻切片 组织处理
时间Sat Oct 6 23:53:05 2012
各位先进!!!!!
想请问大家
欲冷冻切片的组织取下後会固定吗?
我是打算用4%PFA固定但 是似乎会对日後染色有所影响
虽说不是每只抗体都会影响，但保守考量之下
想请问其他固定方法 acetone是否可以作为固定液 在使用上需要注意什麽?
另外 常看到会有蔗糖脱水的步骤
想请问这步骤是必需的吗?若不脱水会造成什麽样的影响?
因为实验室一些人似乎也没有做这个动作
麻烦各位!!谢谢大家
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 111.242.80.80
1F：→ vandia:PFA对免疫染色的影响比较小,别用acetone 10/07 08:54
2F：推 leoblack:推楼上~目前对染色影响较小的还是PFA~ 10/07 09:48
3F：推 susu8n0:不脱水冷冻後组织中有冰晶，切片会坑坑洞洞 10/07 10:57
4F：→ goshr:要用PFA固定的话, 何不做石蜡切片呢 ^^ 10/07 15:07
速度比较快，目前我用的是腊切，我的认知石蜡和冷冻切片的抗原完整度还是有差?并且在
paper上我的sample大多还是以冷切为主
所以想试试看冷切
5F：推 vandia:石蜡要加热,有些抗体会认不到... 10/07 19:34
谢谢各位!!!!!!!
※ 编辑: caesar0926 来自: 111.242.80.80 (10/08 00:09)