作者EDONIS (ED)
看板Biotech
標題[求救] 細菌生長曲線測定
時間Fri Oct 5 00:58:12 2012
請問測生長曲線，我先把菌在2CC養16小時，
然後再拿10ul放到10ml的LB錐形瓶，
37度250RPM去搖1小時後，加IPTG到1mM去表現
每隔20分測一次OD!!
請問這樣的步驟有甚麼地方不妥嗎??
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 123.195.13.23
1F：→ Invec:1mM IPTG, 1M細胞會被毒死吧 10/05 01:00
※ 編輯: EDONIS 來自: 123.195.13.23 (10/05 01:12)
2F：→ skybreeze:菌是甚麼? 為甚麼要加IPTG?? 長得快的菌20分測一次OK 10/05 02:37
3F：→ EDONIS:我把我要的序列塞到BL21裡面!!10ul轉到10ML不知道量夠嗎? 10/05 03:34
4F：→ EDONIS:因為一小時後還清澈的!!!加到50ul妥當嗎?? 10/05 03:35
5F：推 TOTO:我們實驗室pre culture 1/10 volume overnight 隔天早上再 10/05 05:59
6F：→ TOTO:用final volume去姚，第一次OD通常是1.5小時候測，之後每15分 10/05 06:00
7F：→ TOTO:測一次，大約兩小時可以到0.6，這是BL21 or SG13009 10/05 06:00
8F：→ TOTO:為什麼你先加了IPTG才要測OD? 10/05 06:00
9F：→ TOTO:有時候為了省時，我們pre culture量會到1/5，一小時可以OD=1 10/05 06:02
10F：推 iamwi:有測試過此濃度IPTG會不會影響生長嗎? 10/05 16:45
11F：→ EDONIS:我是測試IPTG加入後，會不會有殺菌的表現!! 10/05 21:03