作者EDONIS (ED)
看板Biotech
标题[求救] 细菌生长曲线测定
时间Fri Oct 5 00:58:12 2012
请问测生长曲线,我先把菌在2CC养16小时,
然後再拿10ul放到10ml的LB锥形瓶,
37度250RPM去摇1小时後,加IPTG到1mM去表现
每隔20分测一次OD!!
请问这样的步骤有甚麽地方不妥吗??
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 123.195.13.23
1F:→ Invec:1mM IPTG, 1M细胞会被毒死吧 10/05 01:00
※ 编辑: EDONIS 来自: 123.195.13.23 (10/05 01:12)
2F:→ skybreeze:菌是甚麽? 为甚麽要加IPTG?? 长得快的菌20分测一次OK 10/05 02:37
3F:→ EDONIS:我把我要的序列塞到BL21里面!!10ul转到10ML不知道量够吗? 10/05 03:34
4F:→ EDONIS:因为一小时後还清澈的!!!加到50ul妥当吗?? 10/05 03:35
5F:推 TOTO:我们实验室pre culture 1/10 volume overnight 隔天早上再 10/05 05:59
6F:→ TOTO:用final volume去姚,第一次OD通常是1.5小时候测,之後每15分 10/05 06:00
7F:→ TOTO:测一次,大约两小时可以到0.6,这是BL21 or SG13009 10/05 06:00
8F:→ TOTO:为什麽你先加了IPTG才要测OD? 10/05 06:00
9F:→ TOTO:有时候为了省时,我们pre culture量会到1/5,一小时可以OD=1 10/05 06:02
10F:推 iamwi:有测试过此浓度IPTG会不会影响生长吗? 10/05 16:45
11F:→ EDONIS:我是测试IPTG加入後,会不会有杀菌的表现!! 10/05 21:03