作者pishiu ()
看板Biotech
標題[求救] Western blot
時間Tue Sep 25 13:34:11 2012
不知道為什麼
跑western
壓actin都會有類似下面這張圖的現象
http://tinyurl.com/d6b2pjp
有人可以救救我嗎?
用麗春紅染色都看不到這些現象
用冷光儀拍都會有這種現象
就是反白
而且很怪的反白
因為有時候是整個band都是白的
有時候卻是一半是白的~一半是正常
很詭異!!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.139.11
1F：推 martyrtitan:曝光久一點 09/25 14:21
2F：→ pishiu:定量不是看第一張圖嗎? 09/25 17:41
3F：→ pishiu:就算後面愈來愈黑.. 定量不是看顏色和外框嗎? 09/25 17:59
4F：→ jsi:actin量多，使ECL很快就反應掉了，可試試減少抗體濃度~ 09/25 19:13
5F：推 REIDO:一開始就白底黑bands嗎？上面其他protein可以放同一張拍嗎？ 09/27 17:05
6F：推 qiet:二抗稀釋多少? 可能可以再稀一些 有類似的狀況過 09/28 01:28
7F：→ pishiu:2抗 1:100000 09/28 09:56
8F：推 martyrtitan:1:100000!? 哪一家的2抗這麼濃@@ 09/29 18:50
9F：→ martyrtitan:我用cell signaling的都是1:5000 (RM都是) 09/29 18:51
10F：推 CD133:actin太強燒掉了，一抗1:10000室溫十分鐘就好，二抗也差不多 10/03 17:43