作者pishiu ()
看板Biotech
标题[求救] Western blot
时间Tue Sep 25 13:34:11 2012
不知道为什麽
跑western
压actin都会有类似下面这张图的现象
http://tinyurl.com/d6b2pjp
有人可以救救我吗?
用丽春红染色都看不到这些现象
用冷光仪拍都会有这种现象
就是反白
而且很怪的反白
因为有时候是整个band都是白的
有时候却是一半是白的~一半是正常
很诡异!!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.139.11
1F：推 martyrtitan:曝光久一点 09/25 14:21
2F：→ pishiu:定量不是看第一张图吗? 09/25 17:41
3F：→ pishiu:就算後面愈来愈黑.. 定量不是看颜色和外框吗? 09/25 17:59
4F：→ jsi:actin量多，使ECL很快就反应掉了，可试试减少抗体浓度~ 09/25 19:13
5F：推 REIDO:一开始就白底黑bands吗？上面其他protein可以放同一张拍吗？ 09/27 17:05
6F：推 qiet:二抗稀释多少? 可能可以再稀一些 有类似的状况过 09/28 01:28
7F：→ pishiu:2抗 1:100000 09/28 09:56
8F：推 martyrtitan:1:100000!? 哪一家的2抗这麽浓@@ 09/29 18:50
9F：→ martyrtitan:我用cell signaling的都是1:5000 (RM都是) 09/29 18:51
10F：推 CD133:actin太强烧掉了，一抗1:10000室温十分钟就好，二抗也差不多 10/03 17:43