作者yuasa (XD)
看板Biotech
標題[求救] 細胞在顯微鏡下拍起來感覺有氣泡?
時間Tue Jul 10 23:25:18 2012
以螢光顯微鏡拍細胞(hela cell)時
在phase contrast的鏡頭下常會看到不明的 類似氣泡狀的東西
體積並不小有細胞的1/5或更大 而且都是粘在細胞上的
有時也有點像細胞漲起來一粒那樣
我猜想是以4% paraformaldehyde fix 或染hochest dye後才出現的
因為之前直接拍沒有處理的活細胞並不會有這種情形
不知有版上先進遇過類似情形嗎?
該怎麼改善呢?
謝謝
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◆ From: 163.25.89.5
1F：→ vandia:有沒有圖可以放上來? 07/11 11:05
3F：→ femto:blebbing,細胞不健康 07/11 20:08
4F：→ yuasa:但是不fix直接拿dish去看並不會有耶 是fix+染核後才會出現@@ 07/11 20:12
5F：→ vandia:固定的時候有降溫嘛？ 07/11 20:36
6F：→ femto:1.blebbing的速度蠻快的 07/11 21:07
7F：→ femto:2.你是看同一盤,fix看是健康的,fix有問題嗎? 還是看不同盤? 07/11 21:08
8F：→ femto:2.你是看同一盤,fix前是健康的,fix後才有問題嗎? 07/11 21:15
9F：→ yuasa:不是同一盤，不過先前做的從沒fix跟染核就沒有這情形，而後 07/11 23:44
10F：→ yuasa:來為了染核而fix之後，幾乎都會有這問題發生= =，我下次fix 07/11 23:44
11F：→ yuasa:前會先看一下情形，btw速度蠻快是多快的呢?我treat我的藥物 07/11 23:45
12F：→ yuasa:5分鐘後就拿去fix 15 min，之後染hochest約5 min，時間蠻短 07/11 23:46
13F：→ NKTcell:染染看hochest 染得到代表時核酸類物質 那就是汙染了 07/12 05:20
14F：→ NKTcell:我猜應該是汙染到微生物 07/12 05:20
15F：→ femto:建議留意細胞生長速度,細胞不健康只能解凍新的 07/12 10:40
16F：→ yuasa:hochest非常地乾淨，其他的dye染起來也是完全沒問題 07/12 13:50
17F：→ yuasa:同一批的細胞我都持續地繼代和做其他實驗(上flow)，都正常 07/12 13:51