作者yuasa (XD)
看板Biotech
标题[求救] 细胞在显微镜下拍起来感觉有气泡?
时间Tue Jul 10 23:25:18 2012
以萤光显微镜拍细胞(hela cell)时
在phase contrast的镜头下常会看到不明的 类似气泡状的东西
体积并不小有细胞的1/5或更大 而且都是粘在细胞上的
有时也有点像细胞涨起来一粒那样
我猜想是以4% paraformaldehyde fix 或染hochest dye後才出现的
因为之前直接拍没有处理的活细胞并不会有这种情形
不知有版上先进遇过类似情形吗?
该怎麽改善呢?
谢谢
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◆ From: 163.25.89.5
1F：→ vandia:有没有图可以放上来? 07/11 11:05
3F：→ femto:blebbing,细胞不健康 07/11 20:08
4F：→ yuasa:但是不fix直接拿dish去看并不会有耶 是fix+染核後才会出现@@ 07/11 20:12
5F：→ vandia:固定的时候有降温嘛？ 07/11 20:36
6F：→ femto:1.blebbing的速度蛮快的 07/11 21:07
7F：→ femto:2.你是看同一盘,fix看是健康的,fix有问题吗? 还是看不同盘? 07/11 21:08
8F：→ femto:2.你是看同一盘,fix前是健康的,fix後才有问题吗? 07/11 21:15
9F：→ yuasa:不是同一盘，不过先前做的从没fix跟染核就没有这情形，而後 07/11 23:44
10F：→ yuasa:来为了染核而fix之後，几乎都会有这问题发生= =，我下次fix 07/11 23:44
11F：→ yuasa:前会先看一下情形，btw速度蛮快是多快的呢?我treat我的药物 07/11 23:45
12F：→ yuasa:5分钟後就拿去fix 15 min，之後染hochest约5 min，时间蛮短 07/11 23:46
13F：→ NKTcell:染染看hochest 染得到代表时核酸类物质 那就是污染了 07/12 05:20
14F：→ NKTcell:我猜应该是污染到微生物 07/12 05:20
15F：→ femto:建议留意细胞生长速度,细胞不健康只能解冻新的 07/12 10:40
16F：→ yuasa:hochest非常地乾净，其他的dye染起来也是完全没问题 07/12 13:50
17F：→ yuasa:同一批的细胞我都持续地继代和做其他实验(上flow)，都正常 07/12 13:51