作者homfans (homfans)
看板Biotech
標題[求救] 蛋白質定量
時間Thu May 31 20:44:06 2012
蛋白質定量最常用的是Bradford法與Lowry法
他們的原理都是形成藍色後測吸光值
波長分別是595nm與650-750nm
但是我的sample是藻藍蛋白
本身就呈現藍色且最大吸收波長為615-620nm
所以我怕會造成干擾而不準
這樣我該用什麼方式去定量我的蛋白質呢??
謝謝
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.44.106
1F：→ caesar0926:nanodrop = =?? 05/31 23:41
2F：→ even2300471:是否有tyrosine可用自身螢光定量? 06/01 02:16
3F：推 captdavince:經費不缺的話可以買life technologies的kit是螢光. 06/01 11:46
4F：→ captdavince:millipore有新的一台像nanodrop的但是做紅外線吸光的 06/01 11:47
5F：推 duriamon:原態蛋白質=>拿標準品直接測吸光定量,Denature的樣品=>蛋 06/01 15:52
6F：→ duriamon:白質應該不會影響定量吧? 06/01 15:53
7F：推 alaric:直接用測OD620, 然後 固定 load下定量的蛋白. 06/01 23:07
8F：推 alaric:找到了,每個land load PBP constant in OD620=0.3 x100ul 06/01 23:12
9F：→ alaric:去年跑過PBP isolation, 可惜做了三個月, 沒進一步成果. 06/01 23:13
10F：推 alaric: 100ul at OD620=3 相當100ug of protein 06/01 23:22