作者raiyu (ラルクは信仰)
看板Biotech
標題[求救] 蛋白質加SB煮後還有辦法定量嗎?
時間Thu May 31 08:49:38 2012
昨天匆忙之下 把定量的蛋白質sample打翻了 OTZ
但其他的已經加sample buffer煮了
還有辦法定量嗎? (我們是用BCA法)
還是只能跑WB後用nternal control去比對校正?
(面壁思過中)
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.24.245
1F：推 Rarelay:除非你想要重新沈澱把 SDS, Dye, 還原劑拿掉再定量 05/31 09:48
2F：推 shenhsu:加了SB的sample我們是用10%TCA沉澱 再以少量0.1N NaOH回溶 05/31 10:57
3F：→ shenhsu:之後加水稀釋後即可以bradford定量 05/31 10:58
請問這樣處理後的sample可以用BCA法定量嗎? 還是只能用bradford??
4F：→ hek:可以把protein點在filter上，再用coomassie blue染，與BSA 05/31 17:50
5F：→ hek:standard比對，即可得濃度。 05/31 17:51
※ 編輯: raiyu 來自: 203.77.69.73 (06/01 21:14)
6F：→ illicaw:Thermp 有賣一套BCA (Reducing Agent Compatible) 06/02 00:06
7F：→ illicaw:可以在加了sample buffer之後測濃度 06/02 00:07
8F：→ illicaw:是Thermo > < 06/02 00:07
9F：推 nzj:datasheet都會寫耐detergnets的濃度,如果蛋白質濃度高可以稀釋 06/02 10:40
10F：→ raiyu:謝謝各位高人~ 我研究看看 06/02 12:55