作者raiyu (ラルクは信仰)
看板Biotech
标题[求救] 蛋白质加SB煮後还有办法定量吗?
时间Thu May 31 08:49:38 2012
昨天匆忙之下 把定量的蛋白质sample打翻了 OTZ
但其他的已经加sample buffer煮了
还有办法定量吗? (我们是用BCA法)
还是只能跑WB後用nternal control去比对校正?
(面壁思过中)
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.24.245
1F：推 Rarelay:除非你想要重新沈淀把 SDS, Dye, 还原剂拿掉再定量 05/31 09:48
2F：推 shenhsu:加了SB的sample我们是用10%TCA沉淀 再以少量0.1N NaOH回溶 05/31 10:57
3F：→ shenhsu:之後加水稀释後即可以bradford定量 05/31 10:58
请问这样处理後的sample可以用BCA法定量吗? 还是只能用bradford??
4F：→ hek:可以把protein点在filter上，再用coomassie blue染，与BSA 05/31 17:50
5F：→ hek:standard比对，即可得浓度。 05/31 17:51
※ 编辑: raiyu 来自: 203.77.69.73 (06/01 21:14)
6F：→ illicaw:Thermp 有卖一套BCA (Reducing Agent Compatible) 06/02 00:06
7F：→ illicaw:可以在加了sample buffer之後测浓度 06/02 00:07
8F：→ illicaw:是Thermo > < 06/02 00:07
9F：推 nzj:datasheet都会写耐detergnets的浓度,如果蛋白质浓度高可以稀释 06/02 10:40
10F：→ raiyu:谢谢各位高人~ 我研究看看 06/02 12:55