作者WILLIJOY (KUMO)
看板Biotech
標題[求救] knockdown後 RNA下降 protein沒變
時間Sat May 19 13:40:47 2012
我利用中研院RNAi core定智客製化病毒後,將keratinocyte的某基因knockdown後
測其RNA表現量,KD後的細胞,該基因表現量只剩不到一成(多次結果都相同)
可是PROTEIN看起來卻完全沒有下降
確認抗體(全長)及PRIMER序列(兩個Varien都有被KD )也都沒問題
請問是哪裡出了問題??? 有什麼原因呢???
懇求意見 大謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 163.25.87.42
1F：推 chench0710:你要發現大東西了！加油XD 05/19 14:21
2F：推 icome:確定蛋白偵測技術(e.q.Western blot)沒有問題? 05/19 15:07
3F：推 bioowen:有沒有可能是QPCR的primer efficiency不好?? 05/19 15:09
4F：推 mesenchymal:protein degradation速率太慢? 所以你跑western測 05/19 16:34
5F：→ mesenchymal:到的是原本就存在的protein 05/19 16:34
6F：推 Realthugz:protein turnover 比較慢? 05/19 17:35
7F：→ Realthugz:跟樓上說的基本一樣 05/19 17:36
8F：推 aceliang:half-life 05/19 18:52
9F：推 NMLEG:可能基因表現還沒反應在蛋白質上 再等久一點看看 05/20 20:39
10F：推 tchan:Infect完久一點在收(48-72小時後) 05/24 09:42