作者WILLIJOY (KUMO)
看板Biotech
标题[求救] knockdown後 RNA下降 protein没变
时间Sat May 19 13:40:47 2012
我利用中研院RNAi core定智客制化病毒後,将keratinocyte的某基因knockdown後
测其RNA表现量,KD後的细胞,该基因表现量只剩不到一成(多次结果都相同)
可是PROTEIN看起来却完全没有下降
确认抗体(全长)及PRIMER序列(两个Varien都有被KD )也都没问题
请问是哪里出了问题??? 有什麽原因呢???
恳求意见 大谢
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◆ From: 163.25.87.42
1F：推 chench0710:你要发现大东西了！加油XD 05/19 14:21
2F：推 icome:确定蛋白侦测技术(e.q.Western blot)没有问题? 05/19 15:07
3F：推 bioowen:有没有可能是QPCR的primer efficiency不好?? 05/19 15:09
4F：推 mesenchymal:protein degradation速率太慢? 所以你跑western测 05/19 16:34
5F：→ mesenchymal:到的是原本就存在的protein 05/19 16:34
6F：推 Realthugz:protein turnover 比较慢? 05/19 17:35
7F：→ Realthugz:跟楼上说的基本一样 05/19 17:36
8F：推 aceliang:half-life 05/19 18:52
9F：推 NMLEG:可能基因表现还没反应在蛋白质上 再等久一点看看 05/20 20:39
10F：推 tchan:Infect完久一点在收(48-72小时後) 05/24 09:42