作者babachi ()
看板Biotech
標題[求救] Raw264.7培養問題
時間Thu May 17 12:22:31 2012
請教養過Raw264.7的善心人士
細胞來源:食科所
培養基:90 % SIGMA 的 DMEM with 4mM L-glutamine, 4500 mg/L Glucose 另加
3.7 g sodium bicarbonate ,10% fetal bovin serum, 1% P/S
問題:1. 每次passage,用medium沖細胞下來,medium顏色從黃色變成粉紅色(變鹼?)
2. 最近解凍完胚了約兩次後,細胞全活化了(長腳,沖不下來)
3. 細胞數密度會影響這細胞活化嗎?
被這細胞搞得有點精神衰弱,急需希望有經驗的善心人士幫忙
拜託各位了 感恩
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 203.71.94.5
1F：推 lydiayeh:這株細胞我養的時候是10%FBS/DMEM 但沒外加Glucose 05/17 13:38
2F：→ lydiayeh:細胞密度不能太大 因為長非常快 大概兩天就跟尿一樣XD 05/17 13:38
3F：→ lydiayeh:我之前會把整個配好的medium再過一次濾杯 確保無菌 05/17 13:39
4F：→ lydiayeh:會長腳要嘛是有汙染要嘛是代數太多囉 希望有幫上忙 05/17 13:40
5F：推 mandible:你細胞density太高了!這個細胞長很快!一多就被活化就長腳 05/17 13:46
6F：→ lydiayeh:推樓上 細胞數過多也會長腳>"< 05/17 13:59
7F：→ babachi:謝謝大家的意見~大約多少要種多少呢~我是10mm dish養 05/17 16:21
8F：→ babachi:大家是用刮勺繼代培養比較多還是用medium沖洗下來呢 05/17 16:24
9F：→ ashiniii:想問一下哪來的information說可以沖細胞下來pass? 05/18 01:34
10F：→ ashiniii:我們都是用刮的, 被activate大多是污染了, 不能用了 05/18 01:35
11F：推 cyuchien:啊~~之前給我的實驗室交代要用沖的說...用刮的會長腳..XD 05/18 02:06
12F：→ cyuchien:10%FBS+90%DMEMHG+1%glutamin, 1拆5去分盤 05/18 02:09
13F：→ ashiniii:我們用刮的從來沒activate過,去查ATCC or BCRC你就知道了 05/18 07:30
14F：→ ashiniii:基本上都是要用scrap, 少數人用Tyrpsin但細胞會越來越黏 05/18 07:32
15F：→ ashiniii:但據我所知食工所pass這株是用沖的XD(用tip 05/18 07:34
16F：→ ashiniii:但是也不會像你這樣@@ 05/18 07:35
17F：→ babachi:細胞型態要變成怎樣才真的不能用?我的是會像眼睛一樣~少許 05/18 11:57
18F：→ babachi:又細又長~T^T 05/18 11:57
19F：推 ashiniii:有照片可以看嗎@? 05/20 21:45