作者babachi ()
看板Biotech
标题[求救] Raw264.7培养问题
时间Thu May 17 12:22:31 2012
请教养过Raw264.7的善心人士
细胞来源:食科所
培养基:90 % SIGMA 的 DMEM with 4mM L-glutamine, 4500 mg/L Glucose 另加
3.7 g sodium bicarbonate ,10% fetal bovin serum, 1% P/S
问题:1. 每次passage,用medium冲细胞下来,medium颜色从黄色变成粉红色(变硷?)
2. 最近解冻完胚了约两次後,细胞全活化了(长脚,冲不下来)
3. 细胞数密度会影响这细胞活化吗?
被这细胞搞得有点精神衰弱,急需希望有经验的善心人士帮忙
拜托各位了 感恩
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 203.71.94.5
1F：推 lydiayeh:这株细胞我养的时候是10%FBS/DMEM 但没外加Glucose 05/17 13:38
2F：→ lydiayeh:细胞密度不能太大 因为长非常快 大概两天就跟尿一样XD 05/17 13:38
3F：→ lydiayeh:我之前会把整个配好的medium再过一次滤杯 确保无菌 05/17 13:39
4F：→ lydiayeh:会长脚要嘛是有污染要嘛是代数太多罗 希望有帮上忙 05/17 13:40
5F：推 mandible:你细胞density太高了!这个细胞长很快!一多就被活化就长脚 05/17 13:46
6F：→ lydiayeh:推楼上 细胞数过多也会长脚>"< 05/17 13:59
7F：→ babachi:谢谢大家的意见~大约多少要种多少呢~我是10mm dish养 05/17 16:21
8F：→ babachi:大家是用刮勺继代培养比较多还是用medium冲洗下来呢 05/17 16:24
9F：→ ashiniii:想问一下哪来的information说可以冲细胞下来pass? 05/18 01:34
10F：→ ashiniii:我们都是用刮的, 被activate大多是污染了, 不能用了 05/18 01:35
11F：推 cyuchien:啊~~之前给我的实验室交代要用冲的说...用刮的会长脚..XD 05/18 02:06
12F：→ cyuchien:10%FBS+90%DMEMHG+1%glutamin, 1拆5去分盘 05/18 02:09
13F：→ ashiniii:我们用刮的从来没activate过,去查ATCC or BCRC你就知道了 05/18 07:30
14F：→ ashiniii:基本上都是要用scrap, 少数人用Tyrpsin但细胞会越来越黏 05/18 07:32
15F：→ ashiniii:但据我所知食工所pass这株是用冲的XD(用tip 05/18 07:34
16F：→ ashiniii:但是也不会像你这样@@ 05/18 07:35
17F：→ babachi:细胞型态要变成怎样才真的不能用?我的是会像眼睛一样~少许 05/18 11:57
18F：→ babachi:又细又长~T^T 05/18 11:57
19F：推 ashiniii:有照片可以看吗@? 05/20 21:45